《DR5功能性單抗逆轉卵巢癌順鉑耐藥的機制研究》是依託四川大學，由李春梅擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：DR5功能性單抗逆轉卵巢癌順鉑耐藥的機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李春梅
- 依託單位：四川大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
卵巢癌的鉑類耐藥是影響其化療效果的不利因素。DR5是TNF相關的凋亡誘導配體（TRAIL）的其中一個受體，它與TRAIL結合能誘導腫瘤細胞凋亡，而對人體正常細胞無毒性。本課題套用DR5功能性單抗於耐順鉑卵巢癌細胞凋亡的研究，採用人源化的DR5功能性單抗，利用其不同於順鉑的細胞凋亡信號傳導途徑的機理，探討DR5單抗能否促進耐藥細胞發生凋亡並逆轉卵巢癌細胞順鉑耐藥？DR5功能性單抗與順鉑聯合是否能增強功能性單抗的促凋亡效果？兩者聯合對耐藥細胞殺傷有無協同作用？以及功能性DR5單抗與順鉑聯合對細胞凋亡信號傳導因子caspase表達有何影響？均是本課題擬研究的關鍵問題，以期尋找逆轉卵巢癌細胞對順鉑耐藥的方法。該課題探索可能對順鉑耐藥卵巢癌的生物治療提出新的思路。
結題摘要
目的:DR5單克隆抗體（D-6）單獨或聯合順鉑對卵巢癌A2780細胞、耐順鉑卵巢癌C30細胞及C30裸鼠移植瘤的腫瘤殺傷作用及促凋亡作用研究。方法:MTT法和WST-1法分別檢測不同濃度D-6及順鉑聯合用藥對A2780細胞和C30細胞的生長抑制作用；倒置顯微鏡及電鏡分別觀察A2780細胞和C30細胞在對照組、順鉑組、D-6、聯合組處理後的形態改變；Western Blot分別檢測在A2780細胞和C30細胞中凋亡相關蛋白前體pro-caspase3,8,9的表達情況；流式細胞儀檢測DR5單克隆抗體及順鉑聯合用藥對A2780細胞凋亡的影響。構建裸鼠耐順鉑卵巢癌C30移植瘤模型，檢測不同處理組中實體腫瘤生長抑制效果；檢測C30移植瘤組織中不同組pro-caspase3,8,9的表達情況。結果:隨著D-6濃度的升高，卵巢癌細胞A2780、耐順鉑卵巢癌細胞C30的生長抑制率也逐漸升高，且D-6聯合順鉑用藥對A2780和C30細胞的生長抑制率明顯高於單用D-6，表明D-6能逆轉C30細胞對順鉑的耐藥。A2780細胞、C30細胞的pro-caspase3,8,9表達均下調，且A2780細胞在聯合組中pro-caspase3,8,9表達下調更明顯。A2780細胞和C30細胞均觀察到在D-6組和順鉑組中存在明顯的細胞凋亡形態改變，且這種凋亡形態改變在聯合組中更加明顯。流式細胞儀檢測發現D-6組、順鉑組、聯合組細胞凋亡率均高於對照組，其中聯合組細胞凋亡率最高，明顯高於D-6組和順鉑組。在耐順鉑卵巢癌C30移植瘤模型中， D-6單用或聯合順鉑用藥可以明顯抑制腫瘤生長。D-6聯合順鉑用藥後移植瘤組織中的pro-caspase3,8,9表達明顯下調。結論：D-6對A2780和C30細胞的生長有明顯抑制作用，且與順鉑聯合作用後可增強其抗腫瘤作用，能夠克服耐順鉑C30細胞對順鉑的耐藥，通過caspase依賴凋亡路徑激活腫瘤細胞發生凋亡。DR5單克隆抗體（D-6）可能成為一種有潛力的新型抗腫瘤藥物。
