《DJ-1調控α-突觸核蛋白的內吞在帕金森病發病中的作用》是依託上海交通大學，由康文岩擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：DJ-1調控α-突觸核蛋白的內吞在帕金森病發病中的作用
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：康文岩
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
DJ-1與突觸共核蛋白(α-synuclein)是帕金森病（PD）病理標誌物路易小體的主要成分。兩種蛋白的相互作用在PD發病機制中起著極為重要的作用。α-synuclein易於聚集形成有毒性的寡聚體。我們的體內、體外預實驗表明DJ-1不僅降低α-synuclein聚集體也降低其單體的水平，但具體機制不清。結合最新的研究我們推測DJ-1可能通過調控內吞，促進α-synuclein的降解，發揮抑制α-synuclein的聚集的作用，而脂筏（LR）參與了這一過程。為此，我們將驗證DJ-1調控外源性α-synuclein單體與聚合體的內吞，並明確LR是否參與了外源性α-synuclein的內吞，進而驗證DJ-1通過調控其與LR的相互作用進而調控α-synuclein的內吞。本項目的開展將有助於探索DJ-1與α-synuclein的相互作用在PD發病機制中的作用，為神經保護提供新的靶點。
結題摘要
帕金森病（PD）是最常見的神經變性病之一，因其起病隱匿，早期診斷非常困難。α-突觸核蛋白（α-Synuclein）錯誤摺疊、異常聚集是導致PD的重要病理機制。有研究報導DJ-1可抑制α-Synuclein聚集，並可能發生在聚集體形成的早期階段。可溶性野生型（WT）α-Synuclein單體主要通過分子伴侶介導的自噬（chaperone-mediated autophagy, CMA）降解，CMA損傷與PD的發生密切相關。基於上述研究，本研究將從CMA的角度進一步探討DJ-1缺失突變導致α-synuclein堆積與聚集的發生機制。 許多研究表明α-synuclein寡聚體存在於血漿，腦脊液（CSF）等體液中。病理檢測也提示唾液腺或唾液中含有α-synuclein。我們發現PD患者唾液中DJ-1與α-synuclein 的表達水平成負向關; 唾液α-synuclein水平受其SNP影響，且其寡聚體可能成為PD潛在的診斷標記物，基於以上研究，我們推測在PD相關的細胞模型腦中也存在類似現象。 我們利用DJ-1基因敲除小鼠和siRNA沉默DJ-1表達的SH-SY5Y細胞系作為DJ-1缺失突變的動物和細胞模型來闡述DJ-1缺失導致α-synuclein聚集的發生機制。結果顯示，在整體與細胞水平DJ-1缺失可導致α-synuclein堆積，而在細胞水平過表達DJ-1則抑制了α-synuclein堆積。其次，α-synuclein過表達上調了CMA的限速步驟——溶酶體相關膜蛋白2A（Lysosomal associated membrane protein 2A, LAMP-2A）的表達水平；而DJ-1缺失則抑制了這一變化。進一步分析機制顯示，DJ-1缺失可加速溶酶體內LAMP-2A的降解，這可能是導致LAMP-2A含量降低的原因。本研究提示，DJ-1缺失可通過增加LAMP-2A的降解，進而加劇了α-synuclein的堆積，這提示DJ-1對CMA是一個重要的調節因素。本研究對PD致病基因相關蛋白之間的作用機制提供了實驗證據，對了解DJ-1在PD發病機制中的作用提供了新的機制。
