《DFO通過HIF-1α影響CXCR4陽性牙髓細胞修復能力的研究》是依託上海交通大學，由江龍擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：DFO通過HIF-1α影響CXCR4陽性牙髓細胞修復能力的研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：江龍
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
根據前期的研究結果及文獻複習，我們得出如下假設：1. CXCR4陽性牙髓細胞（CXCR4+ DPCs）可能是牙髓在形成修復性牙本質過程中起重要作用的乾/前體細胞；2. 低氧誘導因子-1α（HIF-1α）可能是牙髓損傷後啟動牙髓修復反應的重要啟動因子；3. 去鐵胺（DFO）或許能夠刺激DPCs產生HIF-1α，促進下游相關靶基因的表達並通過旁分泌作用於CXCR4+ DPCs，從而提高牙髓組織的修復功能。為驗證上述假設，我們擬通過DFO作用DPCs後與CXCR4+ DPC共培養，結合RNA干擾技術，從細胞增殖，遷移、黏附及成牙本質分化四個方面來考察DFO通過HIF-1α對CXCR4+ DPCs修復能力的影響。從而可以進一步完善牙髓幹細胞修復理論，並為臨床開發新型蓋髓劑提供理論支持。
結題摘要
目的：根據前期的研究結果及文獻複習，我們得出如下假設：1. CXCR4陽性牙髓細胞（CXCR4+ DPCs）可能是牙髓在形成修復性牙本質過程中起重要作用的乾/前體細胞；2. 低氧誘導因子-1α（HIF-1α）可能是牙髓損傷後啟動牙髓修復反應的重要啟動因子；3. 去鐵胺（DFO）或許能夠刺激DPCs產生HIF-1α，促進下游相關靶基因的表達並通過旁分泌作用於CXCR4+ DPC，從而提高牙髓組織的修復功能。為驗證上述假設，我們進行本課題研究。材料和方法:1.不同濃度DFO作用CXCR4+ DPCs不同時間後，從對細胞活性、增殖及遷移等幾個方面的影響挑選出DFO的最佳作用濃度及時間。2.以腺病毒作為載體，構建HIF-1α shRNA（pAd/pENTR/shRNA-/GFP-HIF-1α），轉染CXCR4+ DPCs並進行驗證。3.體外觀察DFO作用HIF-1α基因沉默前/後CXCR4+ DPCs成牙本質分化能力的變化。4.觀察DFO預處理HIF-1α基因沉默前/後CXCR4+ DPCs在體內形成牙本質樣組織的情況。結果:1.10µM DFO處理CXCR4+ DPCs 48h，可促進其增殖和橫向遷移，並能提高其HIF-1α的表達，但是對其細胞活性和趨化作用的影響不明顯。2.HIF-1α干擾腺病毒（pAd/pENTR/shRNA-/GFP-HIF-1α）在mRNA水平的乾HIF-1α的表達，並在蛋白水平成功阻斷了DFO促進CXCR4+ DPCs HIF-1α的表達效果。3.10µM DFO處理CXCR4+ DPCs 48h，可以在體外促進其成牙本質分化。幾個與成牙本質分化相關的基因被上調。沉默HIF-1α基因後，DFO成牙本質分化的促進作用將被消除。4.體內實驗結果顯示10µM DFO預處理CXCR4+ DPC 48h後，可在體內形成更多的牙本質樣組織，沉默HIF-1α基因後，CXCR4+ DPCs幾乎不能形成牙本質樣組織。結論:1.DFO處理CXCR4+ DPCs的最佳作用濃度為10M，最佳處理時間為48h。2.成功構建HIF-1α干擾腺病毒（pAd/pENTR/shRNA-/GFP-HIF-1α）。3.DFO可以在體外和體內促進CXCR4+ DPCs成牙本質分化，沉默HIF-1α基因後，DFO成牙本質分化的促進作用將被消除。
