《DEHP與TCDD共暴露與乳腺癌發生髮展的受體互動應答機制研究》是依託天津醫科大學，由湯乃軍擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：DEHP與TCDD共暴露與乳腺癌發生髮展的受體互動應答機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：湯乃軍
- 依託單位：天津醫科大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
DEHP與TCDD作為典型的內分泌干擾物(EDCs)，可與雌激素受體(ER)和芳香烴受體(AhR)結合誘導產生多種毒性效應。乳腺癌作為內分泌相關腫瘤，EDCs的混合暴露被認為是其發生髮展的主要環境因素之一。在前期研究基礎上，本項目擬從ER與AhR互動應答的機制出發，探索二元暴露致乳腺癌發生髮展的聯合效應。擬建立DEHP和TCDD暴露促進正常乳腺上皮細胞惡性轉化和癌細胞侵襲轉移的細胞模型以及人乳腺癌細胞荷瘤裸鼠模型，以AhR/ARNT，XRE，ER和ERE基因操縱方法在體外或體內水平探索分析DEHP與TCDD共暴露對人乳腺癌發生髮展所產生的效應，通過細胞輔活化子的競爭性結合，受體與靶基因啟動子區域募集反應機制，及E2合成代謝及關鍵基因表觀遺傳改變等方面闡明ER-AhR互動應答在乳腺癌發生髮展中的作用，期望明確EDCs共暴露在受體層面的機制，為全面理解腫瘤-環境-基因間的關聯提供理論依據。
結題摘要
本研究旨在探討鄰苯二甲酸-單-2-乙基己酯（MEHP）暴露、四氯二苯並-對-二噁英（TCDD）暴露、MEHP與TCDD共暴露對乳腺癌細胞MCF-7的增殖、遷移和侵襲，以及對芳香烴受體（AhR）信號通路的影響，以闡明MEHP與TCDD共暴露在乳腺癌發展過程中的作用及機制。 1. MEHP暴露6h和48h均可抑制細胞增殖，具體表現為MEHP 10μM、20μM和40μM暴露6h後可顯著抑制細胞增殖，MEHP 1μM、10μM和20μM暴露48h可顯著抑制細胞增殖，其他濃度暴露不影響細胞增殖；轉染siRNA-AhR後並不能緩解MEHP對細胞增殖的抑制作用，表明MEHP抑制增殖作用不依賴AhR；2. TCDD單獨暴露不影響細胞增殖。MEHP與TCDD共暴露6h和48h對細胞增殖的影響存在互動作用，而共暴露12h和24h對細胞增殖無影響。MEHP與TCDD共暴露後，細胞增殖能力顯著降低，表明MEHP與TCDD共暴露可抑制細胞增殖；AhR干擾後並未緩解MEHP與TCDD共暴露對細胞增殖的抑制作用，表明共暴露對細胞增殖的影響不依賴AhR；3. MEHP暴露可促進細胞遷移和侵襲，表現為MEHP 1μM、10μM和100μM暴露24h均可顯著促進細胞遷移，MEHP 10μM和100μM暴露48h後細胞遷移能力顯著高於對照組，MEHP 10μM和100μM暴露48h後細胞侵襲能力顯著高於MEHP 1μM；轉染siRNA-AhR後MEHP 100μM誘導的細胞遷移作用減弱，但是轉染siRNA-AhR不影響MEHP 100μM介導的細胞侵襲。4. PCR-Array結果表明，MEHP暴露可顯著上調23個基因表達，下調8個基因表達；TCDD暴露可顯著上調22個基因表達，下調6個基因表達。在18個基因表達上，MEHP可產生與TCDD相同的作用，包括14個上調的基因和4個下調的基因。5. MEHP與TCDD共暴露對AhR和CYP1A1基因表達存在拮抗性互動作用，MEHP介導的AhR基因表達被TCDD抑制，同時TCDD介導的CYP1A1基因表達可被MEHP抑制；MEHP與TCDD共暴露對CYP1B1的表達互動作用無統計學意義；轉染siRNA-AhR後，TCDD誘導的CYP1A1顯著降低，且MEHP對TCDD介導的CYP1A1表達的拮抗作用消失。
