《Cdx2+胎盤幹細胞移植治療急性心肌梗塞的實驗研究》是依託南京大學，由徐標擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Cdx2+胎盤幹細胞移植治療急性心肌梗塞的實驗研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：徐標
- 依託單位：南京大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
人類心肌細胞是一種自我更新能力很差的終末不分裂細胞，一旦發生心肌梗死等病變，大量有功能的心肌細胞死亡，無法由新生的心肌細胞代替。近年來開展的心臟幹細胞移植為心肌修復提供了可能性，但是既往研究的各種幹細胞，因為療效有效、副作用、倫理學、致畸、免疫排斥等因素無法實施於臨床。新近研究發現滋養層幹細胞可以通過胎盤屏障進入母體的血液循環，歸巢至母體受損的心臟組織，並分化為心肌細胞、內皮細胞、平滑肌細胞，完成對母體心臟的修復。這種幹細胞容易獲取，與母體沒有免疫排斥反應，並具有向心肌細胞分化的傾向性，是理想的可以進行心臟移植的幹細胞。故本項目擬利用轉基因小鼠驗證Cdx2+細胞是否參與妊娠母體的心肌修復，繼而體外分離、純化、增殖Cdx2+細胞，利用Cdx2+細胞移植治療急性心肌梗死，評價其療效和安全性。
結題摘要
研究背景：近些年來開展的幹細胞移植成為修復損傷心肌的新途徑，已經有多種幹細胞被套用於基礎和臨床研究中，但因為副作用、倫理學、致畸性、免疫排斥以及在體向心肌細胞分化較少等限制因素，至今仍沒有一種理想的幹細胞能夠得到認可。最新研究發現在孕鼠的心肌梗死模型中，有大量Cdx2+的滋養層幹細胞歸巢至母體受損的心肌周圍，並分化為心肌細胞、內皮細胞等，有效地完成了對母體心臟的修復，將這種幹細胞在體外與心肌細胞共培養後能高效的向心肌細胞分化。因此，本實驗擬在體外分離培養小鼠Cdx2+滋養層幹細胞，並將其移植至小鼠心肌梗死模型體內，評價其在心肌修復中的有效性和可行性。 研究內容：從攜帶eGFP的C57BL/6妊娠母鼠中分離提取胚泡，在體外培養獲得GFP+的滋養層幹細胞，並從攜帶eGFP的C57BL/6雄鼠骨髓中分離培養獲取GFP+的骨髓間充質幹細胞。同時在C57BL/6普通小鼠上建立心肌梗死模型，在心肌梗死即刻，通過心肌內注射的方式行心梗後幹細胞移植治療。在移植之後的2周和3周，通過心臟超聲檢測小鼠心功能，並在隨後的病理組織切片檢測滋養層幹細胞移植療效及具體機制。 研究結果： 1、幹細胞移植治療之後的2周和3周，兩種幹細胞移植組小鼠左室收縮功能明顯優於PBS組。然而滋養層幹細胞（TSCs）組與間充質幹細胞（MSCs）組相比無明顯差異。2、病理組織染色顯示，細胞移植3周后TSCs與MSCs組梗死面積相比PBS組更小，梗死區室壁厚度（TIM）與梗死邊緣區室壁厚度（WTBZ）明顯增加，邊緣區纖維化程度降低，同時梗死區及邊緣區血管新生增加、邊緣區細胞凋亡明顯減少。TSCs組與MSCs組相比在以上方面未見明顯差異。3、移植後3周在體檢測顯示TSCs較MSCs移植成功率更高，同時TSCs的增殖更多。分化檢測提示TSCs可以向心肌細胞分化，MSCs未檢測到向心肌細胞分化。4、心肌組織microarray分析顯示，TSCs移植至體內之後可能通過調節心肌組織中miR-200b-3p的表達水平，進而發揮旁分泌效應。 研究結論：TSCs作為一種新的幹細胞來源用於移植治療心肌梗死具有一定的可行性，移植之後可以延緩心功能下降。TSCs相較MSCs移植成功率及增殖比例更高，且能明顯增加梗死區及梗死邊緣區細胞增殖，尤其是心肌細胞的增殖，並可能通過調節心梗組織中miR-200b-3p水平而發揮旁分泌效應。
