《COPS3在骨肉瘤細胞幹細胞樣轉化中的作用機制研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由陳軍擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：COPS3在骨肉瘤細胞幹細胞樣轉化中的作用機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：陳軍
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
骨肉瘤幹細胞通常來源於惡變的間質幹細胞，此外在外界因素的誘導下，骨肉瘤細胞（非骨肉瘤幹細胞組分）也可經上皮間質轉化而成為骨肉瘤幹細胞，其分子機制尚未闡明。我們在前一國科金研究中發現：COPS3在骨肉瘤幹細胞中的表達水平顯著高於非乾性骨肉瘤細胞；上調COPS3的表達可促使骨肉瘤細胞幹細胞樣轉化，而c-myc是COPS3過表達的潛在調控分子。由此我們推斷在骨肉瘤細胞幹細胞樣轉化過程中存在c-myc-COPS3調控機制。為了證實上述假設，本研究擬通過多種研究手段證實COPS3促進骨肉瘤細胞幹細胞樣轉化的作用，探討c-myc對COPS3的轉錄調控機制，明確c-myc-COPS3調控機制對骨肉瘤細胞幹細胞樣轉化的意義。本研究將為尋找新的骨肉瘤治療靶點、開發新的治療策略提供理論依據。
結題摘要
骨肉瘤幹細胞通常來源於惡變的間質幹細胞。此外，在外界因素的誘導下，骨肉瘤細胞（非骨肉瘤幹細胞組分）也可經上皮間質轉化而成為骨肉瘤幹細胞，但其分子機制尚未闡明。我們在前一國科金研究中發現：COPS3在骨肉瘤幹細胞樣細胞中的表達水平顯著高於非乾性骨肉瘤細胞；上調COPS3的表達可促使骨肉瘤細胞幹細胞樣轉化，而c-myc是COPS3過表達的潛在調控分子。由此我們推斷在骨肉瘤細胞幹細胞樣轉化過程中存在c-myc-COPS3調控機制。我們希望通過本研究，可以明確COPS3能促使骨肉瘤細胞幹細胞樣轉化；並揭示c-myc調控COPS3過表達的機制，進而證實在骨肉瘤細胞幹細胞樣轉化中存在c-myc-COPS3調控機制。本課題通過以下幾方面內容證實了上述假設：1.利用慢病毒沉默骨肉瘤細胞系U2-OS中COPS3表達，證實COPS3促進骨肉瘤細胞幹細胞樣轉化的作用。U2-OS細胞沉默COPS3表達，發現細胞增殖減慢、克隆形成減少、S期細胞減少、凋亡增加；小鼠成瘤性減弱；表阿黴素耐藥性減低；幹細胞表面標記物Oct4表達下調。2. 探討 c-myc 對 COPS3 的轉錄調控機制。在U2-OS細胞中利用慢病毒沉默c-myc，COPS3 表達降低，細胞增殖減慢、克隆形成減少、表阿黴素耐藥性減低；幹細胞表面標記物Oct4表達下調。前期，通過MatInspector軟體預測COPS3啟動子受c-myc蛋白調控，然而，ChIP實驗得到陰性結果。通過回顧文獻，我們發現COPS3啟動子上游存在myc-鋅指蛋白複合物結合位點。因此，我們推測c-myc極可能是通過綁定在“myc-鋅指蛋白複合物”上，形成蛋白複合物來調控下游COPS3的表達。本項目通過揭示 COPS3 在骨肉瘤細胞幹細胞樣轉化中的作用及其上下游調控通路，為闡明非乾性骨肉瘤細胞向乾性骨肉瘤細胞轉變的分子機制奠定了一定的基礎，為尋找新的骨肉瘤治療靶點、探索新的治療策略提供了部分理論依據。
