《CDKN2A基因影響磺脲類藥物療效的機制研究》是依託北京大學，由任倩擔任負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：CDKN2A基因影響磺脲類藥物療效的機制研究
- 項目負責人：任倩
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
磺脲類藥物是臨床上廣泛使用治療2型糖尿病的口服降糖藥。近期針對磺脲類的藥物遺傳學研究發現CDKN2A基因和磺脲類藥物的代表性藥物--格列本脲的療效以及β細胞功能相關，但具體機制不明。本課題擬通過細胞水平的機制研究探討這種關聯是否存在因果關係，並探索CDKN2A基因影響磺脲類藥物療效的分子機制。本課題通過SiRNA干擾技術沉默CDKN2A基因及通過構建腺病毒載體過表達CDKN2A基因，經轉染胰島細胞系MIN6細胞，研究CDKN2A基因低表達和過表達其對磺脲類所介導的胰島素分泌的影響，以及對磺脲類受體KCNJ11基因和磺脲類轉運子OATP1B3基因表達的影響。同時，在小鼠原代肝細胞中，研究CDKN2A基因低表達和過表達對磺脲類藥物代謝關鍵酶CYP2C9的影響。從上述藥效學和藥代動力學的途徑，探索CDKN2A基因影響磺脲類藥物療效的分子機制，為今後新藥研發和指導個體化診療提供分子生物學的依據。
結題摘要
項目背景：本課題組在前期的藥物遺傳學研究中發現CDKN2A/2B 基因附近非編碼區多態性與格列本脲的療效相關。並且本實驗室的數據以及國外生物信息學分析都證實CDKN2A 基因還和β細胞功能相關。但是否CDKN2A 基因確實能夠影響格列苯脲的療效，具體的影響機制如何，目前尚無報導。主要研究內容：本課題通過細胞水平的機制研究探討這種關聯是否存在因果關係，並探索CDKN2A基因影響磺脲類藥物療效的分子機制。培養小鼠來源的MIN6 細胞系和βTC-6細胞。在沉默CDKN2A 基因,以及過表達CDKN2A基因條件下,研究在高糖刺激或格列苯脲刺激條件下，MIN6細胞／βTC-6細胞胰島素分泌的情況。重要結果和關鍵數據：在MIN6細胞系中建立了過表達CDKN2A基因的模型；在βTC-6細胞系中建立了過表達和低表達CDKN2A 基因的模型。分別測定細胞內的胰島素和細胞外的胰島素水平。發現各組細胞內胰島素的濃度未見統計學差異。提示CDKN2A過表達不影響格列本脲刺激的胰島素分泌。在低表達水平的CDKN2A基因的βTC-6細胞模型中，可以看到βTC-6細胞的胞內、胞外的胰島素水平均未見統計學差異。提示DKN2A低表達不影響格列本脲刺激的胰島素分泌。本研究同時從藥效學和藥代動力學的途徑出發，探索CDKN2A基因影響磺脲類藥物療效的分子機制，但是並未發現CDKN2A基因對KCNJ11基因和INS基因表達的影響。科學意義：本課題在兩種細胞系中，通過改變CDKN2A基因的表達水平，觀察對格列本脲刺激胰島素分泌的影響，但研究結果最終並未觀察到CDKN2A基因的表達對細胞分泌以及合成胰島素水平存在影響。提示既往人群水平所看到的關聯並非因果關係。
