《CDK1蛋白激酶對Borealin的磷酸化修飾在細胞分裂過程中的功能》是依託復旦大學，由曹立環擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：CDK1蛋白激酶對Borealin的磷酸化修飾在細胞分裂過程中的功能
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：曹立環
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
CDK及其周期素是細胞周期的總導演。CDK通過對其他蛋白的磷酸化修飾來驅動細胞周期。闡明細胞周期的分子調節機制對研究癌症的發生，發展和治療具有重要的理論意義。我們的前期實驗證實了CDK1能夠磷酸化Aurora B複合物中的Borealin蛋白，並用質譜技術鑑定了被磷酸化具體位點。有絲分裂激酶Aurora B複合物在細胞分裂過程中起多種調節作用，Aurora B複合物的功能在腫瘤細胞受到異常調節。 本項目將研究CDK1磷酸化Borealin蛋白的在細胞分裂過程中的具體功能，一是研究Borealin的磷酸化修飾對Aurora B複合物的功能影響，包含Aurora B ，INCENP, Survivin在有絲分裂過程中的定位以及Aurora B激酶活性的影響。二是研究Borealin磷酸化修飾對細胞周期的調控，例如多核細胞的比例等，並實時觀察細胞在Borealin磷酸化缺失時有絲分裂的過程。
結題摘要
細胞的增殖過程的協調需通過對細胞周期進行精密調控來實現。周期蛋白依賴性蛋白激酶CDK及其周期素是細胞周期的總導演, CDK通過對其他蛋白的磷酸化修飾來驅動細胞周期。闡明細胞周期的分子調節機制具有重要的理論意義。Aurora B激酶在細胞的有絲分裂`過程對染色體平均分配到子細胞中起重要的調節作用，Aurora B在細胞中與INCENP，Survivin， Borealin組成一個四元複合物，闡明Aurora B複合物中各個亞基在有絲分裂中的作用是當前細胞分裂和細胞周期研究中的一個重要熱點。 在本項目中，我們探討了CDK 蛋白激酶如何調節Aurora B複合物中的Borealin 蛋白的功能，進而調節細胞分裂的正常進行。我們的在實驗中證實CDK1能夠磷酸化Aurora B複合物中的Borealin蛋白，並用質譜技術鑑定了Borealin蛋白被CDK1蛋白激酶磷酸化具體位點為106位，189位。199位，204位的蘇氨酸。利用我們製備的針對Borealin 蛋白189位蘇氨酸的磷酸化多抗， 我們發現在有絲分裂的中期，體內的Borealin蛋白能被CDK1磷酸化。在進一步的研究中我們發現， Borealin 蛋白能在體內結合Sgo1蛋白， 但當Boralin蛋白中的106， 189， 199， 和204位的蘇氨酸突變為丙氨酸時， Boralin蛋白喪失其與Sgo1蛋白的結合能力。 在Hela細胞中轉染Borealin基因的106， 189， 199， 和204位的蘇氨酸突變體（都突變為丙氨酸）能導致有絲分裂受到干擾（多核細胞的比例增加）。這些結果提示Borealin蛋白在有絲分裂的中期被CDK磷酸化是Borealin蛋白結合Sgo1蛋白所必需的， 同時也是細胞進行正常的有絲分裂所必需的。 本項目的研究，在國際上首次鑑定CDK1磷酸化Borealin蛋白的具體位點，同時發現CDK1對Borealin蛋白磷酸化修飾能影響Borealin蛋白與Sgo1蛋白的結合，進而影響有絲分裂的正常進行。一篇與此基金的相關的論文（關於CDK/CYclin在細胞分裂中的進化研究）於2014年1月發表於BMC evolutionary Biology（影響因子3.29）， 本項目是上述論文標註的唯一資助基金。其他涉及此項目的相關的論文正在撰寫中，大概於2014年下半年發表（也將標註此基金的資助）。
