CD66a影響誘導多能幹細胞形成的機制研究

《CD66a影響誘導多能幹細胞形成的機制研究》是依託中山大學，由蔡炳擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：CD66a影響誘導多能幹細胞形成的機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：蔡炳
• 依託單位：中山大學

中文摘要

誘導多能幹細胞(iPSCs) 是體外研究疾病發病機制和藥物篩選的良好模型，但如何提高其形成效率及闡明細胞重編程機制仍是未解決的問題。申請人前期研究發現在小鼠和人iPSCs 形成過程中癌胚抗原粘附分子1（又名CD66a）的表達量會在早期迅速上調，且發現早期流式分選富集的CD66a陽性的細胞更易形成完全重編程的iPS克隆，該技術大幅度提升了iPS的誘導效率和克隆質量。但CD66a影響iPSCs形成的機制尚未明確，鑒於CD66a陽性細胞組具有極強的間質細胞上皮化（MET）特性以及粘附分子被報導具有細胞胞內信號的調控能力，我們推測CD66a可能直接參與胞內信號通路調控影響iPSCs形成。本課題擬在細胞重編程過程中干擾和過表達CD66a蛋白的水平，並利用結合高通量測序、免疫印跡、免疫共沉澱等方法探討CD66a是否作為信號分子直接參與胞內信號通路的調控，以期闡明CD66a影響iPSCs形成的分子機理。

結題摘要

誘導多能幹細胞(iPSCs) 是體外研究疾病發病機制和藥物篩選的良好模型，但如何提高其形成效率及闡明細胞重編程機制仍是未解決的問題。申請人前期研究發現在小鼠和人iPSCs 形成過程中癌胚抗原粘附分子1（又名CD66a）的表達量會在早期迅速上調，且發現早期流式分選富集的CD66a陽性的細胞更易形成完全重編程的iPS克隆，該技術大幅度提升了iPS的誘導效率和克隆質量。但CD66a影響iPSCs形成的機制尚未明確，鑒於CD66a陽性細胞組具有極強的間質細胞上皮化（MET）特性以及粘附分子被報導具有細胞胞內信號的調控能力，我們推測CD66a可能直接參與胞內信號通路調控影響iPSCs形成。本課題運行過程中利用轉錄組學手段對細胞重編程早期CD66a陽性的細胞和陰性的細胞進行了比較，並通過構建CD66a-luciferase-GFP-Puro載體，轉染皮膚細胞以此闡明影響CD66a表達的具體因子；檢測了CD66a在更為全能的人naïve ES上的表達情況。這些研究結果對於闡明CD66a影響iPSCs形成的分子機理具有重要意義。除此之外，利用在生殖中心工作的特點，分離鑑定了睪丸間質幹細胞，實現提升了睪酮低下動物模型的睪酮水平。並利用女性卵巢的顆粒細胞建立了非整合的誘導多能幹細胞，並驗證其基因印記的獨特性。還在人類卵巢組織的冷凍保存和解凍移植、糖尿病對於卵巢的損傷機制等方面開展了研究。以上生殖領域的研究為更好的最佳化生殖器官微環境，闡述其內在的機制提供了重要的研究數據。