《CD47和Band3介導的衰老紅細胞吞噬機制的單分子定位成像研究》是依託吉林大學，由王鋒擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：CD47和Band3介導的衰老紅細胞吞噬機制的單分子定位成像研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王鋒
- 依託單位：吉林大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
紅細胞衰老一直是醫學免疫學的研究熱點。正常紅細胞中發揮抑制吞噬功能的膜蛋白CD47，在衰老紅細胞中可能起著促進吞噬的作用。紅細胞衰老過程中，Band3蛋白斷裂、簇集，形成衰老抗原，通過補體途徑促進吞噬。人紅細胞表面CD47/Band3呈蛋白複合體形式存在，老鼠紅細胞中二者關係尚不明確。細胞衰老時，CD47和Band3如何協調二者的吞噬信號尚有待深入研究。申請人利用dSTORM成像發現：同年輕的老鼠紅細胞相比，CD47在衰老的紅細胞表面呈簇狀分布。此時，CD47/SIRPα傳遞的吞噬抑制性信號消失。本課題以年輕/衰老的人/鼠紅細胞為材料，通過dSTORM成像分析CD47/Band3的空間組裝變化，同時檢測二者下游的磷酸化信號，從而揭示CD47/Band3空間組裝和信號途徑轉換之間的關係，為闡明衰老紅細胞的清除機制提供線索，進而為有核細胞的衰老及紅細胞衰老相關疾病的研究提供參考。
結題摘要
CD47分子是SIRPα 的配體和血小板反應蛋白TSP1的受體。先前研究表明老化紅細胞的清除是有CD47表達的下降和TSP-1結合增加導致。然而，為什麼CD47表達下降，而其與TSP-1的結合卻能夠增加，機制依然不清楚。藉助於隨機光重構顯微鏡（dSTORM）和定量分析，我們發現正常小鼠的紅細胞表面CD47呈納米簇分布，與TSP-1幾乎不結合。我們也證明了雖然衰老紅細胞表面CD47水平顯著下降，它與TSP-1的結合依然增加。雙色dSTORM成像揭示，在衰老紅細胞表面與TSP-1孵育後，CD47可以形成大簇。值得注意的是，脂筏的重新定位參與了衰老紅細胞表面TSP-1誘導的CD47的高階重組。我們進而對造血譜系中造血幹細胞和T細胞表面的CD47分子進行了dSTORM成像，在造血幹細胞表面CD47也存在明顯的大簇；培養的T細胞中，基底層外圍的CD47分子呈大簇分布；中心區域的CD47呈小簇分布；其頂層的CD47分子呈大簇分布。我們推測TSP-1誘導的CD47分子與自身或其他配體的側向相互作用也存在於其他細胞中，比如CD47與Fas 受體、VEGFR、CD36或整合素等，進而起始了相關的信號轉導。本項目為紅細胞衰老過程中，脂筏參與的TSP1誘導的CD47重組、膜皺縮等整體變化提供了直接的形態學證據。
