《CD4+/CXCR5+/CCR6+循環Tfh細胞在ACPA產生中的作用及調控機制》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由李學義擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：CD4+/CXCR5+/CCR6+循環Tfh細胞在ACPA產生中的作用及調控機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李學義
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
抗環瓜氨酸蛋白抗體（ACPA）在類風濕關節炎(RA)關節損傷中起到重要的啟動作用，但其產生機制及調控因素至今不清。 濾泡輔助T細胞（Tfh）定位於生髮中心，在抗體產生過程中發揮決定性作用。最新研究證實外周血CD4+/CXCR5+ T細胞某些亞型具有Tfh細胞潛質稱為循環Tfh，在抗體產生中發揮重要作用。我們前期的研究首次發現RA患者外周血Th17樣亞型（CD4+/CXCR5+/CCR6+）Tfh細胞顯著升高、具有Tfh細胞特性且和ACPA滴度呈正相關，推測其具有生物學活性並參與ACPA生成。 本項目擬套用FACS法分選循環Tfh各亞型，體外培養驗證其對ACPA產生的影響，採用siRNA基因沉默及靶分子阻斷技術在體外培養及SCID模型上驗證其對原始B細胞及ACPA特異性B細胞活化作用及其調控因素，探索其在ACPA產生中作用及分子機制，旨在為RA的早期治療提供新的生物學靶點。
結題摘要
抗環瓜氨酸蛋白抗體（ACPA）在類風濕關節炎(RA)關節損傷中起到重要的“啟動”作用，但其產生機制及調控因素至今不清。ACPA可早於RA關節症狀出現10-15年，ACPA陽性人群更易發展為類風濕關節炎，提示ACPA是RA使動因素，如果能特異性抑制ACPA的產生有望早期治療和預防RA的發生。 目前針對ACPA產生的部位和調控因素尚不清楚，近年來濾泡輔助T細胞（Tfh）在B細胞分化及高親和力抗體產生中發揮重要的調控因素。我課題組對RA關節滑膜和滑液進行了深入研究，我們的結果表明RA膝關節滑膜中有異位“生髮中心樣結構”形成，組化結果表明滑膜中具有樹突細胞、Tfh及B細胞具有異位生髮中心基本結構，並產生激活誘導脫氨酶（AID）和增值誘導配體（APRIL），RA滑液中Tfh細胞比例顯著高於骨關節炎，其中TH17樣Tfh細胞數量和比例均顯著升高且和外周血ACPA、MCV滴度呈正相關，滑液中TH17樣循環Tfh活化後高表達ICOS、CD40L、PD-1，具有Tfh生物學特徵提示ACPA可能產生於關節滑膜局部並受TH17樣Tfh細胞調控。 為進一步研究Tfh細胞在ACPA產生中的作用及調控機制，我們分析了RA患者外周血Tfh各亞型及濾泡調節T細胞（Tfr），首次證實RA患者外周血Tfh及Tfr比例均升高，但Tfr功能性轉錄分子blimp-1下降，提示RA患者體記憶體在Tfh及Tfr失衡。 而針對Tfh亞型分析證實RA患者外周血存在四種亞型（TH1樣、TH2樣、TH17樣亞型、CCR6+/CXCR3+雙陽性），僅Th17樣亞型T細胞數量顯著升高且和抗CCP抗體（ACPA）滴度呈正相關，而和ESR、CRP無明顯相關。在此基礎上我們套用流式細胞儀分選RA患者外周血TH1樣、TH2樣、TH17樣及CCR6+/CXCR3+雙陽性細胞亞群，僅TH17樣亞群及雙陽性THD樣Tfh在CD21刺激下表達共刺激分子ICOS、PD-1、CD147及轉錄分子Bcl-6並分泌功能性細胞因子IL-21。體外實驗證明Th17樣及THD亞群可刺激初始B細胞活化並產生ACPA，阻斷IL-21可顯著抑制ACPA的產生，阻斷CD40和ICOS可不同程度抑制ACPA產生，阻斷信號通路: mTORC1 and mTORC2 可顯著抑制Tfh細胞分化及ACPA產生。研究結果表明TH17樣Tfh細胞在ACPA產生中發揮重要作用，
