《CCN6通過IGF-1通路調節軟骨基質代謝平衡的機制研究》是依託中南大學，由王敏擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：CCN6通過IGF-1通路調節軟骨基質代謝平衡的機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王敏
- 依託單位：中南大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
骨關節炎（OA）的病理本質是軟骨基質進行性破壞，揭示軟骨如何維持基質轉換平衡及基質破壞導致OA的調控機制,是在OA防治藥物上取得突破的關鍵。我們前期發現CCN6基因IGFBP結構域突變可導致基質退化降解為特徵的假性關節炎（PPD），其過高或過低表達分別與基質降解酶過多的OA和基質降解酶過少的PPD密切相關。由此我們假設：CCN6可通過其IGFBP結構域介導的IGF-1信號實現對軟骨細胞外基質/基質降解酶系的精確調節。為此我們將研究正常軟骨基質及其降解酶譜的相對定量表達及CCN6過表達或缺失所引起其表達的改變，確定維持軟骨穩態所需的CCN6蛋白量；判定CCN6是否通過其IGFBP結構域與IGF-1結合調節IGF-1的分泌，進一步調節Wnt/β-catenin或MAPK信號通路來調節基質及基質降解酶的差異表達，揭示CCN6調節細胞外基質相關蛋白的作用機理，為發現骨關節炎藥物防治新靶點奠定基礎。
結題摘要
骨關節炎（OA）的病理本質是軟骨基質進行性破壞，揭示軟骨如何維持基質轉換平衡及基質破壞導致OA的調控機制,是在OA防治藥物上取得突破的關鍵。Wnt1誘導分泌蛋白（Wisp3/CCN6）通過胰島素受體因子-1（IGF-1）通路，參與膠原合成和分泌過程。我們前期發現CCN6基因IGFBP結構域突變可導致基質退化降解為特徵的假性關節炎（PPD），其過高或過低表達分別與基質降解酶過多的OA和基質降解酶過少的PPD密切相關。本次試驗我們構建了CCN6過表達或缺失的軟骨細胞系模型，發現CCN6 過表達或缺失能引起軟骨細胞外基質和基質降解酶譜的改變。我們利用軟骨細胞三維沉澱培養技術在體外培養形成軟骨，通過不同CCN6濃度梯度的設定，發現50ng/ml的CCN6或800ng/ml以上 CCN6均可造成基質金屬蛋白酶的表達相對與正常軟骨細胞出現明顯異常。於是我們進一步對CCN6調節細胞外基質相關因子的功能區進行定位，發現IGFBP 結構域的缺失後，用IGF-1（200ng/ml）去干預細胞，Akt的表達及磷酸化明顯增高，PI3K 活性增強。本次研究確立CCN6通過其IGFBP結構域與IGF-1結合調節IGF-1的分泌，揭示CCN6調節細胞外基質相關蛋白的作用機理，為發現骨關節炎藥物防治新靶點奠定基礎。
