CCL8介導ALA光動力治療皮膚鱗狀細胞癌的效應與機制研究

《CCL8介導ALA光動力治療皮膚鱗狀細胞癌的效應與機制研究》是依託同濟大學，由吉傑擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：CCL8介導ALA光動力治療皮膚鱗狀細胞癌的效應與機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：吉傑
• 依託單位：同濟大學

中文摘要

ALA-PDT能有效治療皮膚鱗狀細胞癌（SCC），治療後出現強烈的炎症反應，瘤體局部可見大量炎症細胞浸潤，但其機制仍不清楚。本課題組前期套用表達譜晶片和生物信息學對紫外線誘導的小鼠皮膚鱗癌樣本進行分析，發現ALA-PDT治療後瘤體局部CCL8 的表達顯著上調，同時，其相關受體表達亦顯著升高，提示ALA-PDT可能通過上調CCL8的表達趨化免疫細胞在腫瘤治療部位聚集，打破腫瘤微環境，啟動抗腫瘤免疫反應。為驗證以上假設，本課題擬進一步套用臨床樣本、小鼠皮膚鱗癌模型，體外採用原代腫瘤細胞與巨噬細胞共培養等體系從體內、細胞與分子水平，探討CCL8在ALA-PDT治療SCC中的作用及機制，為ALA-PDT增敏劑的研發設計提供靶點，為臨床套用ALA-PDT治療皮膚鱗癌提理論基礎。

結題摘要

背景：ALA-PDT誘導的特異性抗腫瘤免疫主要依賴於腫瘤局部大量免疫細胞的募集和激活，而趨化因子在募集免疫細胞的過程中發揮著關鍵作用。在ALA-PDT治療皮膚鱗狀細胞癌（cSCC）中，CCL8表達是否上調，如何發揮作用等科學問題亟待研究。目的：在紫外線誘導SKH-1小鼠cSCC基礎上，建立小鼠皮膚鱗癌細胞系，並構建小鼠cSCC種植瘤模型；在臨床cSCC和小鼠cSCC樣本中確證ALA-PDT上調CCL8的表達；研究CCL8在ALA-PDT治療小鼠cSCC中的作用並進一步探索可能作用機制。方法：建立紫外線誘導小鼠cSCC模型及小鼠cSCC種植瘤模型，基因晶片篩選ALA-PDT後小鼠cSCC組織中上調顯著的趨化因子，在臨床cSCC和小鼠cSCC中驗證ALA-PDT上調CCL8表達，並探索ALA-PDT 對鱗癌細胞和巨噬細胞分泌CCL8的影響；研究ALA-PDT對巨噬細胞的募集及表型影響，CCL8在ALA-PDT對巨噬細胞趨化中的作用；研究ALA-PDT趨化樹突狀細胞（DCs），促進DCs成熟的作用，並研究CCL8在其中的作用；研究ALA-PDT對T細胞招募作用；研究CCL8在ALA-PDT治療小鼠cSCC中作用。結果：從紫外線誘導小鼠cSCC組織中獲得皮膚鱗癌細胞，生長良好並能連續傳代，穩定增殖。SKH¬-1小鼠皮下注射4×106鱗癌細胞XL50後，注射部位均可形成逐注射部位均可形成逐漸增大的腫物，病理檢查結果符合cSCC特徵。ALA-PDT後，小鼠cSCC組織中有6個趨化因子基因表達上調（Fold change ≥ 2.5），其中，CCL8表達上調最顯著。 ALA-PDT上調CCL8及其受體CCR2、CCR23、CCR5的表達，促進鱗癌細胞和巨噬細胞分泌CCL8。ALA-PDT可趨化M1為主巨噬細胞，並可促進巨噬細胞向M1極化。CCL8在ALA-PDT對巨噬細胞的趨化中發揮關鍵作用。CCL8在ALA-PDT趨化DCs，促進DCs成熟中發揮重要作用。ALA-PDT招摹CD4+T細胞及CD8+T細胞在cSCC中聚集。CCL8在ALA-PDT治療小鼠皮膚鱗癌中發揮重要作用，聯合使用CCL8可增強ALA-PDT治療小鼠皮膚鱗癌療效，提高荷瘤小鼠生存率。結論：ALA-PDT可能通過上調CCL8表達，募集大量免疫細胞向腫瘤部位聚集，改變腫瘤微環境，最終清除腫瘤細胞。