《C型肝炎病毒感染中SND1蛋白調節HCV RNA複製的分子機制研究》是依託天津醫科大學，由邵潔擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：C型肝炎病毒感染中SND1蛋白調節HCV RNA複製的分子機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：邵潔
- 依託單位：天津醫科大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
C肝病毒感染機體常引發慢性肝炎、肝硬化甚至肝細胞癌，深入了解HCV感染宿主細胞後其生命周期變化及與宿主細胞間抗病毒反應有重要臨床意義。近年，對應激顆粒抗病毒反應研究成為熱點，但具體機制仍不清。研究表明病毒感染細胞後可活化PKR，抑制翻譯，誘導SG形成。SG中的多種蛋白都被證實參與調節HCV的複製、翻譯。本課題組前期研究首次證實，SND1與G3BP、Ago2在應激刺激下聚集形成SG，是SG中的重要蛋白。由此，我們推測SND1在聚集到SG過程中很可能參與調節HCV RNA在細胞內代謝過程。本課題以HCV-JFH感染Huh7細胞為模型，利用免疫螢光染色、雷射共聚焦成像、RNA干擾、螢光原位雜交等技術探討SND1在HCV感染中調節其RNA複製的分子機制，從而有助於豐富抗病毒的分子理論，為臨床拓展抗病毒治療的新思路。
結題摘要
C肝病毒感染機體常引發慢性肝炎、肝硬化甚至肝細胞癌，深入了解HCV感染宿主細胞後其生命周期變化及與宿主細胞間抗病毒反應有重要臨床意義。近年，對應激顆粒抗病毒反應研究成為熱點，但具體機制仍不清。研究表明病毒感染細胞後可活化PKR，抑制翻譯，誘導SG形成。SG中的多種蛋白都被證實參與調節HCV的複製、翻譯。本課題組前期研究首次證實，SND1與G3BP、Ago2在應激刺激下聚集形成SG，是SG中的重要蛋白。由此，我們推測SND1在聚集到SG過程中很可能參與調節HCV RNA在細胞內代謝過程。本課題以HCV-JFH感染Huh7細胞為模型，利用免疫螢光染色、雷射共聚焦成像、RNA干擾、螢光原位雜交等技術探討SND1在HCV感染中調節其RNA複製的分子機制，從而有助於豐富抗病毒的分子理論，為臨床拓展抗病毒治療的新思路。本項目的研究結果證明SND1可以與HCV的非結構蛋白NS5B相互作用，同時我們通過免疫沉澱實驗和RNA Pulldown實驗證實SND1是HCV RNA複製複合物中的重要組分蛋白之一。我們利用免疫染色和雷射共聚焦顯微技術證實在轉染了JFH-HCV的Huh7細胞中，SND1與HCV Core蛋白產生共定位。另外，利用siRNA的RNA干擾技術將細胞中的SND1水平敲低後發現會降低HCV RNA複製效率。我們也進一步證明在SND1調節HCV RNA複製分子機制中，當SND1表達水平被降低後，HCV RNA複製效率降低並不依賴於microRNA-122的參與作用，證明了microRNA-122不影響SND1參與的HCV RNA複製作用。
