《C型肝炎病毒在中樞神經細胞中的複製及分子機制》是依託北京大學，由劉佳擔任負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：C型肝炎病毒在中樞神經細胞中的複製及分子機制
- 項目負責人：劉佳
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
大量研究表明C型肝炎病毒(HCV)可直接入侵中樞神經系統，然而由於缺乏有效的HCV中樞神經細胞培養模型, 故其具體機制尚不清楚。有報導顯示神經上皮瘤來源的細胞系可支持HCV入胞和複製，但複製效率很低。本研究將使用帶有耐藥基因的HCV亞基因組複製子在中樞神經細胞系中篩選支持HCV複製的細胞克隆。對陽性細胞克隆進行miRNA表達譜、基因表達譜及二維電泳分析，尋找與相應細胞系表達水平有顯著差異的宿主因子。通過在陽性細胞克隆中上調或下調這些宿主因子的表達，選出有效促進HCV複製的宿主因子。我們還將在陽性細胞克隆中過度表達肝臟特異性調節因子miR-122和apoE，檢測其在中樞神經系統細胞系中是否對HCV複製和組裝起促進作用。本項目將對HCV有效複製的中樞神經系統細胞模型的建立起關鍵作用，並為研究HCV在中樞神經系統中感染和複製的分子機制以及中樞神經系統對HCV感染的天然免疫反應奠定堅實的基礎。
結題摘要
高效的HCV體外培養系統對於深入研究病毒與宿主細胞的相互作用起著十分重要的作用。HCV主要在人類肝細胞中複製，但有報導顯示腦組織可能是除淋巴系統以外的另一肝外儲存庫。然而，HCV在這些肝外組織中複製的分子機制目前尚不清楚。本課題的主要目的是尋找HCV在中樞神經系統複製中起關鍵作用的宿主因子，提高HCV在神經系統來源細胞系中的複製水平，為建立支持HCV有效複製的中樞神經系統細胞模型、研究HCV在中樞神經系統中感染和複製的分子機制奠定基礎。有報導表明中樞神經系統來源的細胞系hCMEC/D3可支持HCV的低水平複製。我們在hCMEC/D3細胞株中外源表達HCV進入的四個關鍵受體（CD81、Occludin、Claudin-1、SR-BI），以促進病毒感染。我們還在hCMEC/D3細胞中過表達肝臟特異性的miR-122 和apoE以促進病毒的複製和包裝。我們還在檢測不同嵌合病毒以及有適應性突變的毒株在神經細胞中建立感染的能力，希望拿到能在神經細胞中有效複製的適應性病毒株，同時篩選能支持HCV複製的不同神經系統來源的細胞株，並嘗試在iPS細胞誘導而來的神經細胞中建立支持HCV複製的細胞培養模型。此外，我們還利用已有的成熟HCV體外細胞模型對HCV生命周期的詳細分子機制進行了深入研究，並尋找具有良好抗病毒活性的潛在抗HCV藥物。
