《BID的核質轉位及其磷酸化對肝癌細胞DNA損傷檢控點的調控》是依託廈門大學，由宋剛擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：BID的核質轉位及其磷酸化對肝癌細胞DNA損傷檢控點的調控
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：宋剛
- 依託單位：廈門大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
Bcl2家族促凋亡蛋白BID是死亡受體和線粒體介導細胞凋亡通路的銜接分子。本課題基於新近發現BID作為ATM磷酸化底物激活DNA損傷檢控點，針對BID在肝癌中功能模糊和對DNA損傷應答機制不明，重點從BID的核質轉位和磷酸化修飾兩個方面研究BID對肝癌細胞DNA損傷檢控點激活並進一步分析異位表達核BID（NLS-BID）在肝癌進程中的作用。首先從BID和p53蛋白互作角度闡明BID的核質轉位機制（BID無NLS）；繼而採用異位表達核BID、siRNA和磷酸化位點突變等手段研究BID和磷酸化BID的亞細胞定位及其對DNA損傷檢控點的調控，闡明BID與ATM下游分子的調控關係；最後通過建立穩定表達核BID的肝癌細胞和裸鼠荷瘤模型研究核BID在肝癌發生髮展中的功能機制。本研究可為穩定核BID定位成為DNA損傷修復的潛在分子靶點，或為尋找有效抑制核BID的因子運用到肝癌放化療增敏中提供理論依據。
結題摘要
Bcl2家族促凋亡蛋白BID是死亡受體和線粒體介導細胞凋亡通路的銜接分子。新近發現BID作為ATM磷酸化底物激活DNA損傷檢控點，針對BID在肝癌細胞中的功能模糊和對DNA損傷應答機制不明，本項目重點從BID的核質轉位和磷酸化兩個方面研究了BID對肝癌細胞DNA損傷檢控點的反應，分析了異位表達核BID（NLS-BID）在肝癌進程中的作用，並進一步以BID為腫瘤分子靶點開展相關套用研究。主要發現有：首先，肝癌細胞遭受可修復程度的DNA損傷時，BID分子能部分轉位到核中，而且DNA損傷的效應因子ATM迅速磷酸化BID，在一定程度上拮抗細胞凋亡通路的激活。並且發現BID的核質轉位的實現是通過與p53結合，在p53的協助下實現核質轉運過程。但當肝癌細胞遭受不可修復程度的DNA損傷時，發現BID分子部分以全長形式，部分被剪下成tBID形式轉位到線粒體，通過與BCL2家族其他分子的相互結合而改變線粒體膜電位，導致cyto c的釋放，從而激活下游Caspase依賴的細胞凋亡通路。其次，在以裸鼠皮下成瘤模型的實驗中，BID表現出抑制肝癌發生的作用是胞質BID而非核BID，其機制也與胞質BID激活Caspase依賴的細胞凋亡通路相關。再者，鑒於上述研究發現BID是一個有效的肝癌治療的分子靶點，在闡述幾個潛在抗癌中藥單體分子（如人參皂甙次級代謝產物CK，甘草次酸一些衍生物等）功能機制中均發現可以靶向調控BID分子的線粒體轉位激活Caspase依賴的細胞凋亡通路。同時，我們在DSS誘導的腸炎模型中研究發現炎症反應與BID表達具有相關性，結合其他人的研究結果，我們猜測BID極可能也是連線DNA損傷和炎症反應的橋樑分子，這也是我們下一步重點關注的一個研究方向。本項目的研究提示促進胞質BID線粒體轉位是肝癌治療的潛在分子靶點，可為尋找有效促進胞質BID轉位線粒體的因子運用到肝癌放化療增敏中提供學術依據。
