《BDNF-TrkB在水楊酸鹽致耳鳴中的作用及機制研究》是依託武漢大學，由楊琨擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：BDNF-TrkB在水楊酸鹽致耳鳴中的作用及機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：楊琨
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
外周聽覺系統功能的改變可引起聽覺相關神經元的可塑性改變，而耳鳴的發生極有可能與聽覺系統的可塑性密切相關。前期研究中，我們成功建立了耳鳴動物模型並發現長期注射水楊酸鈉能引起耳蝸外毛細胞能動性增強並導致耳蝸神經自發電生理活動增強。本研究擬運用動物耳鳴行為學檢測法及電生理學方法對耳鳴動物進行篩選，通過動態同步觀察分析長期注射水楊酸鈉過程中和停止注射後大鼠聽覺通路各層面（耳蝸、下丘、耳蝸核、聽皮層等）組織中BDNF-TrkB及c-fos的表達，並與動物行為學（出現耳鳴）的時間相位進行對比，尋找其內在對應關係。同時對GABA/GABAR及KCC2的表達進行檢測，進一步闡明該通路在水楊酸鈉致耳鳴產生中的可能機理。此外，採用可埋植多導矽電極技術在單細胞水平對聽覺中樞神經元的功能改變進行連續動態觀察，進一步探討中樞可塑性變化在水楊酸鈉致耳鳴機制中的作用，為耳鳴及相關內耳疾病的診斷和治療提供新思路。
結題摘要
外周聽覺系統功能的改變可引起聽覺相關神經元的可塑性改變，而耳鳴的發生極有可能與聽覺系統的可塑性密切相關。前期研究中，我們發現長期大劑量注射水楊酸鈉能引起耳蝸外毛細胞能動性增強並導致耳蝸神經自發電生理活動增強。在此基礎上，本研究採用耳鳴行為學檢測法方法對實驗動物是否存在耳鳴進行了驗證，同時對長期注射水楊酸鈉過程中和停止注射後大鼠下丘及聽皮層組織中與中樞可塑性密切相關的因子BDNF、TrkB、c-fos、 GABAA及GAD67的的表達進行檢測，並與動物行為學（出現耳鳴）的時間進行對比。進一步探討水楊酸鈉致耳鳴的可能機理。研究表明：（1）長期注射水楊酸鈉連續7天及14天，動物條件反射消退期明顯縮短，表明其存在耳鳴。而慢性恢復7天開始，到14天、28天實驗動物條件反射消退期時間延長，表明耳鳴趨於消失。（2）長期注射水楊酸鈉組下丘及聽皮層組織中c-fosmRNA及蛋白量的表達均高於正常組，差異有統計學意義（P＜0.05）；c-fos 表達的增高與實驗動物耳鳴存在的時間吻合。（3）長期注射水楊酸鈉組下丘及聽皮層中BDNF及TrkB mRNA及蛋白量的表達均高於正常組，差異有統計學意義（P＜0.05）；表明長期注射水楊酸鈉可能通過上調大鼠聽皮層BDNF及TrkB的表達，使聽皮層神經營養因子的功能增強，進而導致聽皮層的功能重塑。（4）長期注射水楊酸鈉組下丘及聽皮層組織中GAD67、GABAAα1 mRNA及其蛋白表達水平均較對照組明顯升高，差異具有顯著統計學意義（P＜0.01）。長期注射水楊酸鈉導致中樞GABA抑制作用降低，當興奮與抑制效應失衡時，會引起聽覺中樞神經活性增強。於是表現為耳鳴。而GAD67及GABAAa1的增高可能是一種負反饋代償去抑制的失衡狀態，促進抑制性效應的產生。此外，我們採用玻璃微電極記錄技術在單一神經元水平對聽皮層神經元電生理活動進行了初步探討，急性注射水楊酸鈉組大鼠聽皮層神經元中對聲刺激表現為持續性反應的神經元的存在可能與其導致的耳鳴密切相關。
