《Axin-RhoBTB3-VHL複合體調控HIF1信號通路的分子機制及其生物學功能》是依託廈門大學，由林聖彩擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Axin-RhoBTB3-VHL複合體調控HIF1信號通路的分子機制及其生物學功能
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：林聖彩
- 依託單位：廈門大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
低氧誘導因子HIF1α信號通路對腫瘤細胞的代謝與生長有著非常重要的影響。它通過正調節下游基因如GLUT1、HK、LDH、VEGF的表達，促進腫瘤的生存和發展。我們通過包括酵母雙雜交系統、免疫共沉澱、細胞共定位多種方法，鑑定了Axin-RhoBTB3-VHL這個新的複合體。我們發現，RhoBTB3在腎癌樣本文庫中出現顯著下調，而HIF1α的下游基因出現相應上調；用siRNA敲低Hela細胞的RhoBTB3, 並注射裸鼠，可以促進裸鼠移植瘤的生長；過表達RhoBTB3對於HIF1α的蛋白水平具有下調作用，而MG132處理可以抑制這種下調作用。我們擬通過免疫共沉澱、免疫螢光、實時定量PCR等實驗探索低氧刺激下Axin-RhoBTB3-VHL複合體調節HIF1α蛋白水平的分子機制及其對腫瘤細胞生長和代謝的影響。
結題摘要
低氧誘導因子(HIFs)信號通路在腫瘤代謝中起著非常重要的作用，HIFs的異常積累或激活和許多類型的癌症密切相關。然而，HIF1α蛋白如何被調控（包括羥基化和泛素化）的分子機制目前還不清楚。我們在研究中發現，Rho GTPase蛋白RHOBTB3可直接與羥基化酶PHD2相互作用，從而促進HIF1α的羥基化。此外，RHOBTB3也可直接與E3泛素連線酶的重要組成分子VHL蛋白相互作用，促進了HIF1α的泛素化。值得注意的是，我們還發現RHOBTB3可與已知的HIF1α調控因子LIMD1形成二聚體，並組成一個包含RHOBTB3/LIMD1-PHD2-VHL-HIF1α的複合體，從而達到最大限度地降解HIF1α。細胞在缺氧條件下降低了以RHOBTB3為核心的複合體的形成，繼而導致HIF1α的積累。這些發現幫助我們更好地認知HIF1α的調節機制，也揭示了腫瘤細胞面對低氧環境發生應激改變而獲得更好的生長的重要分子機制，為治療腫瘤提供了新的思路和藥物設計靶點。
