《Annexin A3在肺腺癌轉移中的作用及分子機制研究》是依託廈門大學，由劉迎福擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Annexin A3在肺腺癌轉移中的作用及分子機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：劉迎福
- 依託單位：廈門大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
Annexin A3為我們在前期研究中新發現的肺腺癌轉移相關蛋白，經大量臨床資料統計證實：Annexin A3表達與肺腺癌轉移密切相關。然而，Annexin A3在肺腺癌轉移中確切的生物學功能及機制尚未闡明。本項目基於前期研究結果，採用DNA克隆和RNAi 技術分別上調或下調肺腺癌細胞中Annexin A3的表達，系統分析Annexin A3表達水平改變對肺腺癌細胞生物學特性的影響，以明確Annexin A3在肺腺癌轉移中的生物學功能。進一步以靶向蛋白質組學技術鑑定Annexin A3的相互作用蛋白，免疫共沉澱-Western blot等方法驗證其與Annexin A3的相互作用關係。繼以RNAi技術反向驗證Annexin A3相互作用蛋白的功能，以篩選Annexin A3在肺腺癌轉移中關鍵的相互作用蛋白，從而揭示Annexin A3在肺腺癌轉移中的作用機理，為肺腺癌轉移的防治提供新線索。
結題摘要
Annexin A3 為我們在前期研究中發現的一個新的肺腺癌轉移相關蛋白（J Pathol, 2009, 217(1):54-64）。前期研究結果已闡明：Annexin A3表達與肺腺癌轉移和預後密切相關。本項目擬在前期研究結果的基礎上，進一步深入明確Annexin A3 在肺腺癌轉移中的生物學功能以及揭示其作用的分子機制。本項目以肺腺癌A549細胞作為研究對象，首先採用RNAi技術下調A549細胞中的Annexin A3的表達，分析下調Annexin A3表達後A549細胞在體外及體內中生物學行為的改變情況。體外實驗中，MTT assay及平板克隆形成實驗檢測發現下調Annexin A3表達可明顯減慢A549細胞的生長；劃痕實驗檢測發現下調Annexin A3表達可明顯抑制A549細胞遷移；transwell實驗檢測發現下調Annexin A3表達可明顯抑制A549細胞侵襲。體內實驗中，下調Annexin A3表達可明顯抑制A549細胞在體內的成瘤能力及轉移能力。項目進一步對Annexin A3在肺腺癌中的作用機制進行了探索分析。採用Real-time PCR及Western blot技術分析下調Annexin A3表達對A549細胞中一些靶分子的表達改變情況。研究發現：下調Annexin A3表達可明顯降低MMP-2和N-cadherin的mRNA和蛋白表達，但可提高E-cadherin的mRNA和蛋白表達。同時，項目對上述靶分子的蛋白表達情況在體內成瘤的瘤結節中也進行了免疫組化分析。同樣，在體內形成的瘤結節中，上述靶分子也展現與體外相同的表達改變。並且，本項目還分析了下調Annexin A3表達對A549細胞中的信號通路影響。檢測發現：下調Annexin A3表達可明顯降低ERK1/2、MEK1/2、IκBα及Akt的磷酸化水平，而對P38的磷酸化水平卻無明顯影響。總而言之，本項目不僅明確了Annexin A3在肺腺癌中的生物學功能，也初步剖析了其在肺腺癌發生髮展過程中的分子機制，為肺癌的防治及靶向治療提供了新思路和理論基礎。
