《Angiomotin通過Hippo-YAP信號通路調控腎癌幹細胞樣特性的機制研究》是依託西安交通大學，由楊謹擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Angiomotin通過Hippo-YAP信號通路調控腎癌幹細胞樣特性的機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：楊謹
- 依託單位：西安交通大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
目前腎癌臨床治療所面臨的主要挑戰是對放化療不敏感、易復發和轉移。有證據顯示，腎癌幹細胞與腎癌復發、轉移及化學藥物抵抗密切相關。我們在前期研究中發現，當上調Angiomotin(Amot)表達後，腎癌細胞的侵襲轉移能力增強，並伴隨有明顯的腎癌幹細胞亞群細胞增多，以及核定位YAP/TAZ表達升高。鑒於已有證據表明Hippo-YAP通路在幹細胞的自我更新與維持幹細胞特性方面發揮著重要作用。據此，我們提出假說：Amot可通過Hippo-YAP信號通路調控腎癌幹細胞樣特性，進而影響腎癌的惡性生物學行為。在本研究中，我們將分選和鑑定腎癌幹細胞，比較干預Amot表達對腎癌幹細胞樣亞群的影響，並利用體內、外模型來研究Amot與Hippo-YAP信號通路如何通過調控腎癌幹細胞樣的演進來影響腎癌的發展。預期研究結果不僅能進一步豐富腎癌病理機制方面的理論，而且有望為腎癌的治療提供新的靶點和理論依據。
結題摘要
目前腎癌臨床治療所面臨的主要挑戰是對放化療不敏感、易復發和轉移。有證據顯示，腎癌幹細胞與腎癌復發、轉移及化學藥物抵抗密切相關。課題組在前期研究中發現，Angiomotin(Amot)可作為腎癌特異性蛋白標誌物預示疾病的不良預後，其高表達與腎癌的侵襲轉移能力和腫瘤幹細胞樣特性呈現正相關，並伴隨著核定位YAP/TAZ的明顯升高。因此我們提出假說：Amot可通過Hippo-YAP信號通路調控腎癌幹細胞樣特性，進而影響腎癌的惡性生物學行為。基於腎癌幹細胞亞群的成功分選及穩定干預Amot-p130腎癌乾樣細胞株的構建，我們對比觀察了各乾樣細胞亞群的生物學特性，發現Amot-p130能夠在體內外促進腎癌幹細胞樣特性的獲得；利用RNA-seq和iTRAQ等技術，篩選出Hippo-YAP信號通路為Amot-p130的重要下游靶點，進一步通過免疫螢光、核漿分離、螢光素酶報告基因實驗、免疫共沉澱等技術，證實Amot-p130能夠通過與YAP相互作用，促進YAP入核，進而激活YAP-TEAD介導的下游轉錄活性；耐藥相關實驗證實Amot-p130在腎癌幹細胞亞群中能夠降低對化療藥物5-氟尿嘧啶的敏感性，並且調節耐藥蛋白的表達水平。通過驗證Amot在腎癌中可破壞YAP/TAZ與Hippo激酶蛋白的抑制關聯，維持腎癌幹細胞特性，我們的研究結果豐富了腎癌幹細胞理論，為腎癌的治療提供了新的靶點和理論依據。 TCGA資料庫分析結果提示Amot在其他腫瘤中可以發揮不同作用，在乳腺癌中對Amot功能進行初探發現，Amot-p130亞型可通過抑制Wnt/β-catenin信號通路的激活，抑制乳腺癌幹細胞樣特性的獲得，起到抑制乳腺癌發生髮展的作用，提示我們將進一步探索Amot及其亞型在其他惡性腫瘤中發揮的不同作用。
