《ARL15升高載脂蛋白B100導致動脈粥樣硬化的機制研究》是依託北京大學，由孫麗傑擔任負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：ARL15升高載脂蛋白B100導致動脈粥樣硬化的機制研究
- 項目負責人：孫麗傑
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
高膽固醇血症是動脈粥樣硬化疾病的主要危險因素。ARL15是二磷酸核糖基化家族中的G蛋白之一，我們的前期研究證實，ARL15在小鼠肝臟中過表達通過升高ApoB100蛋白水平導致高膽固醇血症，並在體外肝細胞實驗中發現，敲低ARL15能夠降低細胞內ApoB100蛋白的表達及分泌，而其mRNA水平表達並未見改變，推測ARL15可能通過調控ApoB100蛋白的降解來起作用，具體機制未明。本項目擬通過過表達ARL15，經特異性阻斷G蛋白活性及核糖基化作用，初步探尋ARL15作用的分子機制；通過檢測ApoB100分泌及降解的囊泡轉運情況，確定ARL15調控ApoB100降解的關鍵途徑；並通過RNA干擾的方法證明體內ARL15敲低對ApoE缺陷性小鼠動脈粥樣硬化的作用。該研究有助於深入認識ARL15調控ApoB100的降解導致高膽固醇血症的分子機制，為脂代謝紊亂及動脈粥樣硬化的防治提供新的的靶點和思路。
結題摘要
高膽固醇血症是動脈粥樣硬化疾病的主要危險因素，即使採用了最佳的調脂治療方案，也僅能將心血管事件最多只能減少1/3，深入探討脂代謝紊亂的發生及其導致動脈粥樣硬化性疾病的新機制並降低動脈粥樣硬化性心血管疾病的危險至關重要。ARL15是二磷酸核糖基化家族中的G蛋白之一，近年來被GWAS證實與動脈粥樣硬化性疾病有關。我們利用高脂餐餵食C57小鼠誘導的高膽固醇血症模型中，小鼠肝臟組織ARL15的 mRNA及其蛋白表達水平均明顯增高，提示ARL15基因參與脂代謝紊亂的過程。ARL15在小鼠肝臟中過表達通過升高ApoB100蛋白水平導致高膽固醇血症，敲低ARL15能夠降低細胞內ApoB100蛋白的表達及分泌，具體機制未明。本項目的主要內容1.體外實驗通過對肝臟細胞進行ARL15基因的過表達及敲低，檢測APOB分泌及降解過程中分子伴侶的表達情況，進而闡明ARL15在APOB降解及分泌的囊泡轉運過程中的重要作用；2.體內實驗通過採用ApoE缺陷型小鼠，建立動脈粥樣硬化小鼠模型，構建及包裝表達ShARL15基因的重組腺相關病毒，觀察ARL15基因敲除的抗動脈粥樣硬化作用。結果發現，ARL15通過G蛋白活性以及ADP核糖基化作用上調APOB100的分泌，其上調ApoB100分泌的過程是通過上調MTP的表達促進含ApoB100的脂蛋白顆粒轉運，以及下調內質網中ApoB降解相關的分子伴侶HSP70，HSP90，以及GRP78，GRP94蛋白的表達情況，從而減少APOB在內質網中的降解機制完成的；通過在小鼠體內實現ARL15的升高及敲低，證實了上調ARL15的水平能夠促進動脈粥樣硬化的進展，而下調ARL15的水平有助於減輕動脈粥樣硬化的作用。該研究有助於深入探討高ApoB血症的分子機制，為脂代謝紊亂及動脈粥樣硬化的防治提供新的的靶點和思路。
