《AEG-1跨膜蛋白結構及其在新型腫瘤疫苗製備中的套用研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由董軻擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：AEG-1跨膜蛋白結構及其在新型腫瘤疫苗製備中的套用研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：董軻
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
AEG-1在多種惡性腫瘤中高表達，並與腫瘤發生、發展密切相關，是一個重要的腫瘤生物治療新靶點，但因其跨膜蛋白結構分型仍存有較大爭議，限制了AEG-1在抗腫瘤疫苗研發中的套用。課題組前期研究表明，抗AEG-1蛋白C末端抗體可結合於AEG-1胞外區且抑制腫瘤生長，推測AEG-1為Ⅱ型跨膜蛋白。本課題擬套用融合標籤蛋白及免疫細胞化學等技術進一步驗證AEG-1跨膜蛋白結構分型，並結合體內外實驗分析AEG-1胞外肽段在腫瘤細胞增殖中的作用機制；進而製備AEG-1胞外肽段攜帶免疫佐劑Flagellin的嵌合型VLPs疫苗，免疫BALB/c鼠，通過ELISA、ELISPOT及流式細胞技術等方法評價小鼠細胞及體液免疫應答水平；並藉助乳腺癌小鼠模型探討該新型抗腫瘤VLPs疫苗的抑瘤作用，最終為AEG-1胞外段作為腫瘤疫苗治療靶點提供理論及實驗依據，也為其它腫瘤抗原疫苗的設計提供一個全新思路和方法。
結題摘要
AEG-1在多種惡性腫瘤中高表達，並與腫瘤發生、發展密切相關，是一個重要的腫瘤生物治療新靶點，但因其跨膜蛋白結構分型仍存有較大爭議，限制了AEG-1在抗腫瘤疫苗研發中的套用。本課題套用融合標籤蛋白及免疫細胞化學等技術驗證AEG-1跨膜蛋白結構分型，證實其C末端位於胞外，並證實AEG-1胞外段單克隆抗體在體外水平能夠抑制乳腺癌細胞增殖、促進細胞凋亡，且在體內水平對乳腺癌荷瘤小鼠具有抑瘤作用；進而製備AEG-1胞外肽段攜帶免疫佐劑Flagellin的嵌合型VLPs疫苗（AEG-1C-Flic-VLPs），免疫BALB/c小鼠，通過ELISA、細胞因子ELISA等技術評價小鼠細胞及體液免疫應答水平，結果顯示AEG-1C-Flic-VLPs免疫組小鼠產生較高的抗體水平，脾淋巴細胞產生較多的細胞因子IL-2與INF-γ；接種乳腺癌細胞後，AEG-1C-Flic-VLPs免疫組小鼠成瘤率低，生存率較高；AEG-1C-FliC VLPs對小鼠的免疫治療作用研究結果顯示AEG-1C-FliC VLPs免疫組小鼠生存率高且成瘤後腫瘤生長緩慢。我們進一步表明，VLPS長期接種對小鼠體質量無影響且接種後重要器官未見明顯的病理組織學變化。以上結果為AEG-1胞外段作為腫瘤疫苗治療靶點提供理論及實驗依據，也為其它腫瘤抗原疫苗的設計提供一個全新思路和方法。
