《ADAR1調控Caveolin-1對肺微血管內皮細胞通透性的影響及機制研究》是依託同濟大學，由陳遠卓擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：ADAR1調控Caveolin-1對肺微血管內皮細胞通透性的影響及機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：陳遠卓
- 依託單位：同濟大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
急性肺損傷為常見危重疾病，病死率高達40％。其核心病理變化之一是肺微血管內皮細胞（PMECs）通透性增加導致的大量滲出、炎症和水腫，臨床治療仍很棘手，研究其上游調控機制可為其基礎研究和臨床治療提供新策略。前期通過RNA腺苷脫氨酶1（ADAR1）血管內皮特異敲除小鼠模型發現ADAR1缺失可致肺通透性和血漿NO濃度顯著增高，體外血管內皮細胞中下調ADAR1可致窖蛋白（Caveolin-1）明顯下調。結合前期研究，我們初步提出“ADAR1缺失可致PMECs通透性增高，其調控Caveolin-1影響NO釋放是其關鍵作用機制”。下一步我們擬通過ADAR1內皮特異敲除小鼠和原代PMECs模型，證實ADAR1在PMECs通透性調控中的重要作用並闡明其調控機制。本項目將提出並證實一個在PMECs通透性調控中具有重要作用的新分子，可為血管內皮細胞調控研究、肺損傷相關的基礎研究和將來的臨床治療提供新的方向。
結題摘要
急性肺損傷為常見危重疾病，病死率高達40％。其核心病理變化之一是肺微血管內皮細胞（PMECs）通透性增加導致的大量滲出、炎症和水腫，臨床治療仍很棘手，研究其上游調控機制可為其基礎研究和臨床治療提供新策略。本項目通過系列分子、細胞和動物實驗，建立了ADAR1ECKO小鼠穩定繁殖體系，發現1周時ADAR1ECKO小鼠存活率為61.8%，4周后小鼠存活率為52.3%，顯著低於ADAR1flox/flox小鼠。ADAR1ECKO小鼠肺泡可見塌陷，融合，肺泡間隔增厚，肺間質水腫，肺泡內出血，而ADAR1flox/flox小鼠肺組織病理切片未見異常。證實了ADAR1ECKO小鼠ADAR1蛋白和CAV-1蛋白的表達顯著低於ADAR1flox/flox小鼠。發現了ADAR1ECKO小鼠較ADAR1flox/flox小鼠肺組織通透性明顯增加，ADAR1ECKO組小鼠肺功能儲備下降，肺功能受損。使用CD31磁珠分選成功施行ADAR1ECKO和ADAR1flox/flox小鼠肺血管內皮原代細胞分離和培養，進一步證實了ADAR1ECKO肺血管原代內皮細胞中CAV-1蛋白表達下降，而eNOS蛋白表達無差別。證實了ADAR1過表達可以降低IL-1β誘導的內皮細胞炎症激活，而ADAR1敲減可以增強此效應，miRNA-143直接靶向結合ADAR1調控此過程：miRNA-143過表達可以抑制ADAR1表達，而miRNA-143敲減可以促進ADAR1表達，從而調控下游內皮細胞炎症激活。通過項目實施，研究團隊申請的國家實用新型專利1項，發表SCI論文2篇，國核心心期刊論文1篇。資助項目參與人國際學習與交流2次。培養碩士研究生2名。本項目發現ADAR1是肺內皮細胞結構和功能的重要全新調控因子，且其可以被miRNA-143調控，為肺血管內皮損傷的機制研究提供了全新的通路，為後續臨床治療和藥物研究提供了全新的靶點。
