ABIN1對μ阿片受體功能的調節作用及機制研究

《ABIN1對μ阿片受體功能的調節作用及機制研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由周培嵐擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：ABIN1對μ阿片受體功能的調節作用及機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：周培嵐
• 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院

中文摘要

在前期工作中我們通過篩選嗎啡依賴大鼠腦cDNA文庫發現μ阿片受體C末端與ABIN1存在相互作用；ABIN1過表達可抑制μ阿片受體激活、磷酸化、泛素化、內吞及脫敏。ABIN1是一個泛素化調節蛋白，G蛋白偶聯受體的泛素化與受體內吞及再循環有密切關係。目前ABIN1調節μ阿片受體功能的機制尚不清楚。本課題擬首先研究ABIN1與μ阿片受體相互作用的結構功能域；然後研究ABIN1對細胞周期、GTP酶、磷酸激酶的影響；研究ABIN1下調μ阿片受體磷酸化、泛素化與去泛素蛋白A20的相關性；通過對斑馬魚進行ABIN1基因敲減和過表達，研究阿片類藥物急慢性作用後斑馬魚的行為學改變。本研究為探尋阿片成癮防治的潛在藥物靶標提供依據。

結題摘要

嗎啡、海洛因等物質的非法使用和由此產生的毒品成癮已經成為席捲全球的社會公害，此類物質成癮性強，根治極為困難。為了闡明阿片成癮的機制，解決阿片依賴耐受，在前期工作中我們通過篩選嗎啡依賴大鼠腦 cDNA 文庫發現μ 阿片受體 C 末端與 ABIN1 存在相互作用；ABIN1 過表達可抑制μ 阿片受體激活、磷酸化、泛素化、內吞及脫敏。本項目在前期工作的基礎上發現，ABIN-1與MOR相互作用後能夠明顯延緩MOR脫磷酸化。ABIN1還能夠與MOR的重要銜接蛋白βarrestin2有相互作用，進而促進βarrestin2上膜，此外，ABIN1與GRK2也有弱的相互作用。 ABIN1過表達後，能夠下調GRK2、Smurf2和βarrestin2的mRNA水平，這可能是ABIN1抑制MOR磷酸化與內吞的機制之一。在細胞水平，ABIN1過表達後，除能夠抑制DAMGO急性作用於MOR的激活作用外，還能明顯降低DAMGO慢性作用後的耐受作用。對DAMGO慢性作用於MOR後引起的pERK和pCREB的上調也有抑制作用。ABIN1的不同剪接變體與MOR相互作用研究發現，AHD2結構功能域是與MOR相互作用並抑制受體磷酸化的結構域。在斑馬魚幼魚敲減ABIN-1後，幼魚對嗎啡的處理後運動距離較對照明顯延長，反之，在過表達ABIN-1後，其運動距離明顯縮短。這些結果提示，ABIN-1與MOR相互作用後能負性調控MOR的功能。 為了探究ABIN-1對嗎啡鎮痛耐受的影響， C57小鼠全腦過表達ABIN-1後，在熱板模型上，嗎啡對ABIN1過表達小鼠急性鎮痛及鎮痛耐受作用較對照組小鼠明顯下降，ABIN1過表達後能夠明顯抑制嗎啡依賴納洛酮催促戒斷反應。反之，腦室注射ABIN1干擾RNA下調全腦ABIN1表達後，能夠明顯增強嗎啡的鎮痛作用，同時嗎啡的鎮痛耐受作用也明顯增強，納洛酮催促戒斷後，ABIN1敲減小鼠的戒斷反應較對照組小鼠明顯增加。通過以上研究表明ABIN1過表達後能夠明顯抑制嗎啡的軀體依賴作用。進一步用條件性位置偏愛模型（CPP）來觀察ABIN1對嗎啡精神依賴的影響，結果發現ABIN1過表達後明顯抑制嗎啡誘導的小鼠CPP的形成。反之，ABIN1敲減後能夠增加嗎啡誘導小鼠的CPP形成。通過以上研究說明ABIN1過表達能夠明顯抑制嗎啡引起的小鼠自發活動的增加和精神依賴行為。通過本項研究說明ABIN1