100bp DNA ladder是由10條PCR擴增片段混合而成的。
基本介紹
- 外文名:100bp DNA ladder
- 組成:10條PCR擴增片段混合
- 儲藏緩衝液:10mMTris-HCl(PH8.0
- 儲存條件::長期儲存
簡介,儲存條件,使用說明,
簡介
該DNA ladder由10條100~1000bp的片段組成,大片段均比小片段增加100bp,其中500bp片段是量增加一倍以便於電泳後觀察。
儲藏緩衝液:10mMTris-HCl(PH8.0),1mMEDTA
儲存條件
長期儲存,-20℃;短期保存:-4℃
使用說明
1. 在DNA Markers的儲存或使用過程中應避免反覆凍融。
2. 在長期冷凍保存過程中,可能會形成DNA濃度梯度,使用時應在解凍後進行振盪混和並進行短暫的離心。
3. 該DNA Markers可以用其儲存緩衝液、TE緩衝液或1×內切酶緩衝液進行稀釋。
4. 推薦凝膠濃度或上樣量:2.0~2.5%瓊脂糖凝膠(溴化乙淀終濃度:0.5ug/ml);5~10ul/膠孔。
5. 關於電泳時間:一般採用5V/㎝凝膠長度的恆定電壓進行電泳,直到所有的DNA片段守全分開為止。如電泳時間太短,DNA片段將不能完全分開,如電泳時間太長,較小的DNA片段將會擴增。
6. 關於6×Loading Dye:該上樣液含有10mM Tris-HCl(PH8.0),1mM EDTA,2.5% bromophenol blue,4% sucrose。一般向5份DNA溶液中加入一份6×Loading Dye,例如:向10ul DNA Ladder中加入2ul 6×Loading Dye。
7. 該DNA Ladder不能提供準確的DNA濃度指標,因此不能用來進行DNA片段的定量測定。
8. 儲存緩衝液中含有1×Loading Dye的產品,可以直接點樣。