《黑素介導的monophora著色霉對唑類抗真菌藥物耐藥機制研究》是依託中山大學，由馮佩英擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：黑素介導的monophora著色霉對唑類抗真菌藥物耐藥機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：馮佩英
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
由monophora著色霉引起的著色芽生菌病是復發率高、頑固難治性皮下真菌病，其主要原因在於病原菌富含黑素毒力因子。漆酶是黑素合成途徑中的關鍵酶。最近文獻及我們初步研究結果提示：真菌黑素野生株較白化株對唑類抗真菌藥物的敏感性下降，表明黑素是抗真菌抵抗因子。然而，其確切分子機制有待研究。本項目設計以monphora著色黴黑素野生株（CBS 122845）、白化株(CBS 125149)和siRNA技術構建的漆酶Lac基因干擾株為模型，使用液相色譜-質譜／質譜聯用(LC-MS/MS)檢測比較細胞壁黑素/胞內唑類藥物/胞內麥角固醇含量，探討黑素抵抗唑類抗真菌藥物的機制；基因晶片篩查黑化株與白化株之間的耐藥相關差異基因，進一步從分子水平闡明著色霉對唑類藥物不敏感/耐藥的原因。本項目結果為探明著色芽生菌病系統抗真菌療效差的原因，以及制定新的治療策略、開發新的抗真菌藥物作用靶點提供新思路和實驗依據。
結題摘要
由monophora著色霉引起的著色芽生菌病是復發率高、頑固難治性皮下真菌病，其主要原因在於病原菌富含黑素毒力因子。漆酶是黑素合成途徑中的關鍵酶。最近文獻及我們初步研究結果提示：真菌黑素野生株較白化株對唑類抗真菌藥物的敏感性下降，表明黑素是抗真菌抵抗因子 。然而，其確切分子機制有待研究。本項目分別通過DOPA黑素合成途徑和DHN黑素合成途徑抑制劑檢測野生株黑素的合成情況，並對其進行定性和定量的測定，發現野生株黑素的含量在疊氮化鈉抑制劑和三環唑抑制劑下有明顯的下降，單一途徑或聯合途徑抑制劑均未能完全抑制野生株黑素的合成，但顯微鏡和電鏡下顯示在疊氮化鈉抑制劑和三環唑抑制劑下與白化株的細胞壁黑素顆粒減少。進一步的體外藥敏試驗結果顯示在黑素抑制劑下的不同菌株對氟康唑、伊曲康唑和沃力康唑MIC有差異，但無明顯統計學意義。此外，本項目通過對monphora著色霉基因組生物信息學分析、聚類分析和比對野生株及白化株轉錄組表達結果，初步推斷具有4個內含子的漆霉Lac4（AYO21_07092）具有較強的臨床聯繫。本項目結果明確monophora著色霉同時存在DOPA黑素合成途徑和DHN黑素合成途徑，其黑素存在與否對氟康唑、伊曲康唑和沃力康唑MIC有一定差異，而漆霉Lac4基因可能與monophora著色黴黑素差異有關。
