《麥拓萊黴素合成基因簇的序列測定及功能分析》是依託天津大學,由喬建軍擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名:麥拓萊黴素合成基因簇的序列測定及功能分析
- 項目類別:面上項目
- 項目負責人:喬建軍
- 依託單位:天津大學
- 負責人職稱:教授
- 申請代碼:C0104
- 研究期限:2006-01-01 至 2008-12-31
- 批准號:30570042
- 支持經費:26(萬元)
項目摘要
構建麥拓萊黴素生產菌株的基因文庫,利用已克隆的基因為探針,調取合成麥拓萊黴素的全部基因,測序後進行生物信息學分析,通過與已測序的其它聚酮合酶基因進行比較,了解抗生素合成基因簇的結構與功能,推斷抗生素的合成途徑及調節機制;然後根據同源交換原理,利用質粒pKC1139構建阻斷麥拓萊黴素合成基因簇不同功能元件的突變株,經突變恢復實驗驗證後,套用液質聯用和氣質聯用檢測突變菌株中的抗生素合成中間產物,比較在不同位點阻斷的突變株的代謝產物,分析不同功能元件的功能,推斷抗生素的合成途徑;另外,將麥拓萊黴素合成基因簇的一個功能元件或幾個功能元件基因與硫脂酶基因連線後在變鉛青鏈黴菌中表達,套用液質聯用和氣質聯用比較分析不同表達體系的產物,確定這些功能元件的功能。通過以上研究,逐步確定麥拓萊黴素合成基因簇的各組成單位的功能並推斷麥拓萊黴素的合成途徑,為了解抗生素的合成調控機制及定向選育高產菌株奠定基礎。