《鹽酸小檗鹼調控SCD1表達改善肝臟脂肪沉積的機制研究》是依託復旦大學，由卞華擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：鹽酸小檗鹼調控SCD1表達改善肝臟脂肪沉積的機制研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：卞華
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
鹽酸小檗鹼(BBR)有降低肝臟脂肪等多重代謝改善作用，但作用機制未完全闡明。硬脂醯輔酶A去飽和酶(SCD)1可催化飽和脂肪酸向單不飽和轉化，SCD1敲除小鼠對高脂飲食誘導的脂肪肝等代謝異常產生明顯的抵抗作用。我課題組前期研究顯示BBR可使脂肪肝大鼠肝臟異常上調的SCD1表達下調至正常，並有促固醇調節原件結合蛋白(SREBP)1上游轉錄因子腺苷活化蛋白激酶(AMPK)磷酸化作用。SCD1啟動子存在SREBP1結合位點，我們推測存在AMPK-SREBP1-SCD1通路，其功能異常對脂肪肝形成具有病理意義，而BBR可能作用於該通路發揮代謝保護作用。本項目擬構建SCD1、AMPK敲低或過表達動物細胞模型，建立SCD1啟動子螢光素酶報告基因，構建缺失SRE突變體及SRE重複序列報告基因闡明該調節機制，探索BBR是否通過增加AMPK磷酸化，下調SREBP1來抑制SCD1表達，改善肝臟脂肪的作用新機制。
結題摘要
背景：小檗鹼（BBR）是從中藥黃連根部提取的一種天然化合物，在臨床上已被證明能有效地緩解非酒精性肝脂肪變性。然而，這一作用背後的機制尚未完全闡明。 方法：檢測脂肪醯輔酶A去飽和酶1（SCD1）在ob/ob小鼠肝臟的表達。檢測小檗鹼對高糖和棕櫚酸處理的HepG2和AML12細胞的作用。油紅O染色分析甘油三酯（TG）含量。採用實時定量聚合酶鏈反應（QPCR）和蛋白質印跡法（WB）分別檢測相關基因的mRNA和蛋白表達。雙螢光素酶報告基因實驗測定BBR對SCD1啟動子的活性。 結果：SCD1在ob/ob小鼠的肝臟中表達增加。不管體內或體外實驗，BBR降低了肝臟TG的積累，降低了肝臟SCD1和其他與TG合成相關的基因的表達水平。在脂肪肝細胞中，SCD1敲低可以模擬BBR降低細胞TG沉積的作用，而SCD1的過表達減弱了BBR降低細胞TG沉積的作用。機制方面，BBR促進HepG2細胞和高脂飲食小鼠肝臟腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）和固醇調節元件結合蛋白-1c（SREBP-1c）的磷酸化。小檗鹼通過AMPK-SREBP-1c通路的激活和SCD1啟動子中的SRE區抑制SCD1表達。 結論及意義：BBR通過激活AMPK-SREBP-1c-SCD1通路，降低肝臟TG合成，從而減輕肝臟脂肪變性。該研究結果可為臨床使用BBR治療NAFLD提供部分理論依據。
