《鴨疫里默氏菌脂多糖合成關鍵基因LpsA的功能解析》是朱德康為項目負責人，四川農業大學為依託單位的面上項目。
基本介紹
- 中文名：鴨疫里默氏菌脂多糖合成關鍵基因LpsA的功能解析
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：朱德康
- 依託單位：四川農業大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
鴨疫里再笑臘默氏菌病是目前危害世界各國水禽業最為嚴重的傳染病之一，其病原鴨疫里默氏菌（RA）是重要的獸醫病原微生物。脂多糖是革蘭氏陰性菌主要的表面成分，包括脂質A，核心多糖和O-抗原，是細菌重要的毒力因子，同時在致病機理、激活機體免疫系統及血清學分類等方面具有重要作用。首先對RA脂多糖進行分離純化鑑定並解析其化學結構。其次在完成對RA全基因組序列測定並進行生物信息學分析，結果顯示一段長度為939bp的編碼序列（LpsA）與脂多糖合成關鍵基因高度同源，提示該基因與毒力密切相關。然後以該基因作為重組靶位點，以RA疫苗株為親本，通過同源重組整合到RA基因組中樂汗悼拘，局漿戰篩選重組陽性菌株。對獲得的基因缺失株的脂多糖進行化姜辨拒簽學結構解析，比較與親本疫苗株脂多糖結構的差異，確定脂多糖結構變化與其毒力強弱的關係，並研究基因缺失株的生物學特性、黏附、侵襲力以及對鴨的安全性、免疫效力及攻毒保護。
結題摘要
背景：鴨疫里默氏菌主要引起鴨、鵝、火雞以及其他禽類嚴重的敗血症，是目前危害世界各國水禽業最為嚴重的傳染病之一。脂多糖是革蘭氏陰性菌主要的表面成分，包括脂質A，核心多糖和O-抗原，是細菌重要的毒力因子，同時在致病機理、激活機體免疫系統及酷姜血清學分類等方面具有重要作用。目前就鴨疫里默氏菌的脂多糖化學結構、合成及遺傳調控尚未見相關報導。研究內容：（1）對RA脂多糖進行分離純化鑑定並解析其化學結構；（2）完成對RA全基因組序列測定並進行生物信息學分析；（3）以脂多糖合成關鍵基因LpsA作為重組靶位點，以鴨疫里默氏菌疫苗株為親本，通過同源重組整合到RA基因組中，篩選重組陽性菌株；（4）對獲得的基因缺失株的生物學特性、黏附、侵襲力以及對鴨的安全性、免疫效力及攻毒保護進行評價分析。重要結果：獲得了RA脂多糖完整的的化學結構，構建了RA脂多糖合成關鍵基因LpsA缺犁希狼失菌株，確定了RA脂多糖合成關鍵基因LpsA與其毒力關係，確定LpsA基因缺失株的生物學特性、黏附和侵襲力，完成了基因缺失株對鴨安全性試驗、免疫及攻毒保護試驗。關鍵數據：（1）發表學術論文4篇，其中SCI收錄論文3篇，申請專利2項，學術會議論文3篇；（2）培養畢業碩士研究生5名；（3）首判檔陵次揭示了鴨疫里默氏菌O-抗原的化學結構，解析了與其相應的O-抗原基因簇，這一發現為闡明鴨疫里默氏菌的血清分型及其致病機制提供了新的方向。
