魚類傳染性脾腎壞死病（Infectiousspleen and kidney necrosis，簡稱ISKN）俗稱鱖暴發性出血病，是由傳染性脾腎壞死病毒（Infectious spleen and kidney necrosis virus，簡稱ISKNV）引起、發生在魚類身上的一種病害。病魚缺氧、身體失去平衡、應激反應減低，體表變黑、出血，鰓蒼白，剖檢發現脾臟和腎臟腫大，肝臟上有出血點等。
魚類傳染性脾腎壞死病是一種主要嚴重危害淡水養殖蹶的傳染性、病毒性疾病，可引起暴發性死亡。在廣東、湖南、湖北、江蘇、浙江等魚主養區流行致死率超90%。另外在中國將其列為二類疫病。
預防該病應對苗種場、良種場實施防疫條件審核、苗種生產許可管理制度。加強疫病監測與檢疫，掌握流行病學情況。通過培育或引進抗病品種，提高抗病能力。加強飼養管理、切斷傳染途徑。
基本介紹
- 中文名：魚類傳染性脾腎壞死病
- 外文名：Infectiousspleen and kidney necrosis
- 別名：鱖暴發性出血病
- 危害物種：魚類，嚴重危害鱖類
- 病原：傳染性脾腎壞死病毒
病害學史,病原特徵,為害症狀,流行情況,診斷方法,初步診斷,樣品採集,實驗室診斷,防治措施,
病害學史
自從1997年首次從鱖魚上發現報導ISKNV以來，該病已經在中國大部分的地方被確診。
在韓國、朝鮮、馬來西亞、菲律賓、泰國、日本和新加坡等亞洲國家也有發病案例，甚至已通過水產品貿易傳入加拿大、澳大利亞、德國等地。
病原特徵
傳染性脾腎壞死病毒在透射電鏡下觀察為六邊形，直徑為150納米，病毒粒子在細胞質中裝配，成熟病毒粒子在胞質中積聚星晶格狀排列；福爾根染色和吖啶橙染色顯示為雙鏈DNA病毒；病毒有囊膜，對熱（50℃，30分鐘）、酸鹼性和紫外線敏感，處理後病毒失去致病力。根據形態結構、理化特性和生物學特性，進一步證實ISKNV為虹彩病毒（Iridovirus）。四種化學試劑：高錳酸鉀、甲醛、碘和次氯酸鈉中，次氯酸鈉對病毒的滅活效果最好，高錳酸鉀和甲醛次之，碘在試驗的濃度範圍內對病毒沒有滅活作用，因此建議生產實際中多用含氯的消毒劑預防魚類傳染性脾腎壞死病。
傳染性脾腎壞死病毒成熟二十面體病毒體
成熟二十面體病毒體，顯示外囊和內膜的細節，中心電子透明核心。
為害症狀
病魚身體失去平衡，易離群漫遊，同時有缺氧症狀。鰓蓋、口腔周圍、下領、胸緒、腹充血（圖1），偶爾還伴有眼球突出症狀，鰓絲失血發白，時常伴有爛鰓及寄生蟲感染（圖2），容易引起誤診。解剖後腹腔內常伴有腹水，肝臟呈現白色，有出血點，腎脾腫大，有的能看見明顯的出血點（圖3）。腸內充滿黃色物質（圖4）。
魚類傳染性脾腎壞死病為害症狀
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流行情況
病毒通過腹腔注射、肌肉注射、劃痕浸泡、浸泡、同池浸泡和口服等6種途徑感染，引起發病死亡。肌肉感染的發病潛伏時間最短，為7天；腹腔注射感染為8天浸泡、劃痕浸泡和同池浸泡都為9天：口服感染的時間最長為22天。病毒感染後，發病魚通過體表出血、尿液和類便等方式將病毒排放到環境水體中。魚類傳染性脾腎壞死病毒病的主要通過水體傳播。
具有明顯的季節性
28~30℃是該病的最適流行水溫，水溫在20℃以下很少發病。該病在寶應地區主要發生在6月下旬至10月上旬（期間高溫階段有暫停期）11月中下旬水溫下降後死亡率大幅下降。
發病急，死亡率高
發病塘口早期每天死亡十幾尾，幾天內可增至上百尾，甚至上千尾，死亡率達90%以上。
對外部條件刺激極為敏感
季節交替、氣候突變、晝夜溫差大、水環境惡化、其他病原感染、用藥不當等均可誘發或加劇病情。
可致死及病情反覆
可單獨感染致死，也可因感染後抵抗力下降伴隨著多種寄生蟲、細菌感染致死或病情反覆。
診斷方法
初步診斷
根據病魚典型的臨床症狀作出初步診斷。
樣品採集
採集10尾病魚，取脾和腎（特別是脾）。
實驗室診斷
組織學檢測：病魚的脾、心、腎、肝和鰓進行組織切片，顯微鏡觀察典型、異常的巨大細胞，嗜鹼性細胞腫大。
病毒檢測：可疑樣品的組織液接種斜帶石斑魚罐細胞系（GF-1），25℃生化培養中培養，10天內用相差顯微鏡觀察細胞病變（CPE）情況。7天可疑樣品還未出現CPE，而對照樣品已出現CPE，應立即再次傳代細胞。如果仍未出現CPE，視為陰性，排除可疑。當CPE出現後，必須用免疫學方法或PCR方法鑑定病毒，免疫螢光檢測為陽性，則可以確診為本病。用RSIV的上游引物（5·-CGGGGG-CAA-TGA-CGA-CTA-CA-3’）和下游引物（5’-CCG-CCT-GTGCCT-TTT-CTG-GA-3’）進行PCR擴增RSIV的586bp基因片段。對PCR陽性條帶進行測序，與RSIV基因序列相同可作出診斷。
ISKNV感染板塊的腎臟組織的組織學圖像
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防治措施
進行有效的池塘處理
有條件的塘口可設定獨立的進排水系統，避免與其他塘口發生交叉感染。養殖前期對養殖塘口（特別是前一年發病塘口）進行乾塘清淤，選擇連續睛好天氣，使用大量生石灰化水全池潑灑。塘口連續曝曬1周以上，期間需多次翻動塘底淤泥，確保塘底病原能被高pH和紫外線殺滅。
放養健康苗種，合理設定放養密度
儘量從有資質的省、市級苗種場購苗，堅決不從傳染性脾腎壞死病發病嚴重的地區引進苗種。有條件的可購買經過鑑定的無毒苗種，或者將購進的苗種送至當地有資質的檢測機構進行PCR檢測，確保未攜帶ISKNV後再下塘。
根據池塘條件及養殖技術水平合理設定放養密度，建議適當降低放養密度，特別是有發病史的塘口。每畝放養3~5厘米苗種1000~1200尾，放養密度過大，水體溶氧消耗較大，魚的排泄物較多，造成氨氮、亞硝酸鹽急劇升高，對養殖水體環境造成較大壓力，水質管理困難，疾病風險升高。同時，塘內還可適當套養少量花白鰱、河蟹以減少水體中的殘餌及有機質，降低水質惡化的風險。
餌料魚的管理
餌料魚的質量好壞直接關係到魚的抗病能力。餌料魚池塘要定期使用消毒劑進行消毒處理。餌料魚飼養過程中，要長期在飼料中添加維生素C和大蒜素以提高餌料魚的抗病能力。有實驗表明，ISKNV具有一定的宿主範圍。它不僅能感染蹶魚，還能感染其他種類的魚。而魚類病毒是可以通過食物經口和消化道傳播，餌料魚放養前最好也經過PCR檢測，確保未攜帶ISKNV。另外，餌料魚在往魚池塘投餵前需經過嚴格消毒，建議用4%~5%食鹽水浸泡數分鐘。
發病高峰前期管理
每年6月下旬至10月上旬為魚類傳染性脾腎壞死病發病高峰期（期間高溫階段有暫停期），為保證有一個健康體質和良好的養殖環境來平穩度過發病高峰期，前期養殖管理尤為重要。加強水質管理，魚苗種下塘後，每10天用EM菌、光合細菌等有益微生物製劑調節水質，確保水中有益菌占據優勢地位。5月初寄生蟲發病高峰期使用硫酸銅或苦參鹼殺蟲1次，每月根據水質情況使用聚維酮碘等消毒殺菌，再使用微生物製劑調節水質。
發病期管理
當發現有可疑症狀時要及時送檢，確診為魚類傳染性脾腎壞死病後，應及時撈除病魚及死魚，深埋消毒，進行無害化處理。此時塘內的魚體質較弱，不要添、換水，切忌病急亂投醫，盲目用藥，防止魚體產生應激反應，死亡量增大減少甚至停止投餵餌料。使用聚維酮碘等溫和的消毒劑對水體消毒1~2次，再使用微生物製劑調節水質，同時增加水體溶氧，確保水體溶氧在5.0毫克/升以上。漁具不要與未發病塘口混用，以防交叉感染。
疫苗研究
魚類傳染性脾腎壞死病疫苗包括細胞滅活疫苗、重組亞單位疫苗和DNA疫苗等。細胞滅活疫苗具有安全性好、免疫原性強、保護率高、研發周期短等優點，成為最常用的疫苗種類。另外ISKNV重組亞單位疫苗和DNA疫苗也取得較好的進展。
