高載藥率的多重靶向抗腫瘤納米藥物載體研究

《高載藥率的多重靶向抗腫瘤納米藥物載體研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由范黎擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：高載藥率的多重靶向抗腫瘤納米藥物載體研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：范黎
• 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學

中文摘要

化療藥物的非特異性毒性及腫瘤細胞的耐藥性等問題已成為當今腫瘤治療亟待解決的問題。微納米藥物載體載藥率普遍較低的現狀也成為制約腫瘤靶向治療的瓶頸。本課題擬採用葉酸和殼聚糖為原料，製備能主動靶向葉酸受體過多的腫瘤細胞，並能靈敏回響腫瘤pH值釋藥的納米凝膠系統，同時合成高載藥率負電荷納米金，共轉運抗腫瘤藥物DOX及其增敏劑PDTC，並通過靜電吸附將載藥納米金包裹於納米凝膠內部。通過NMR、HPLC、透射電鏡、體外螢光成像、流式細胞術、Western blot和ICP-MS等手段測定載藥納米凝膠理化性質、定量分析納米金提高載藥率的能力、及驗證載體pH回響釋藥性能，增敏劑促進藥物入胞的能力及主動靶向提高藥物入胞率等相關生物學特性。本課題整體設計以同時實現提高載藥率、主動靶向、智慧型回響釋藥，克服阿黴素多藥耐藥性為最終目的，以期製備出具有高載藥率的多重靶向納米抗腫瘤藥物載體。

結題摘要

本課題設計針對目前納米藥物載體載藥率難以提高、靶點單一及靶向效率低等缺點，旨在構建高載藥率與多重靶向藥物遞送相結合的新型高效納米藥物轉運體系。在完成項目標書設計內容的基礎上，申請者進一步改進研究方案，構建出更高效靶向遞送抗腫瘤藥物的納米藥物載體。研究內容主要分為以下四個方面： 1. 構建殼聚糖、葉酸殼聚糖納米凝膠包裹負電荷金納米粒（AuCOOH@CS/FACS）為載體，實現化療藥物和生物製劑的同時靶向遞送，具有高載藥率，靶向遞送及發揮藥物協同作用的特點。AuCOOH@FACS體系可將95%以上的AuCOOH帶入細胞。動物實驗結果證實，AuCOOH@FACS給藥組可顯著抑制腫瘤生長，瘤體質量僅為對照組的1/40。 2. 為進一步增強靶向性，減少載體的系統毒性，將靶向分子葉酸替換為合作實驗室研發的新型FAT1分子靶向單克隆抗體，並將AuCOOH修飾配基（MUA）改為更具有生物相容性的（HS-PEG-COOH），在發揮金納米粒載藥率高的優勢之餘，增強靶向特異性。將FAT1分子特異性靶向單克隆抗體mAb198.3接合至AuCOOH表面，通過TEM，共聚焦顯微鏡及小動物活體呈像等手段，驗證其腫瘤細胞及腫瘤組織靶向特異性。結果表明，mAb198.3不僅能將99%以上的AuCOOH帶入colo-205細胞，且尾靜脈給藥後，裸鼠瘤體藥物濃度為單純抗體給藥的15.5倍，為AuCOOH_isotype（同型對照）的28.4倍。 3. 在完成標書設計的基礎上，為使體系能用於同時負載更多藥物，將僅具有pH敏感特性的CS外殼換成可自降解的SiO2外殼，通過吸附和包裹兩種不同的載藥方式，製備不依賴於外部刺激即可實現多種藥物逐級釋放的序貫遞送體系。該體系可通過表面修飾單抗進行主動靶向，並通過不同的藥物裝載機制及藥物裝載濃度調節藥物釋放的速率，使體系在不引入刺激回響化學鍵的基礎上，能主動靶向，高效入胞及精確逐級釋放不同種類的藥物。完成該體系序貫遞送研究後，繼續將AuCOOH表面結合單抗與siRNA，與SiO2體系結合，製備出能同時遞送三種不同藥物的靶向納米序貫遞送體系。 標書設計的研究目標已基本實現，研究內容已發表於Biomaterials，Nanoscale，JECCR，Plos one等SCI雜誌，共5篇，申請發明專利1項。