《高溫放線菌休眠芽胞表面活性蛋白酶的性質及功能研究》是依託武漢大學，由唐兵擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：高溫放線菌休眠芽胞表面活性蛋白酶的性質及功能研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：唐兵
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
高溫放線菌（Thermoactinomyces）屬的成員在形態上類似放線菌，但與芽胞桿菌屬具有親緣關係，在它們的菌絲末端形成內生孢子（芽胞）。高溫放線菌芽胞能夠引起人類及動物過敏性肺炎（農民肺）。在前期工作中，我們發現高溫放線菌菌株CDF休眠芽胞表面具有蛋白酶活性，並在休眠芽胞表面鑑定到一種新的蛋白酶CDF。本項目擬在全面掌握該酶生化特徵的基礎上，進一步對該酶在芽胞各組分中的定位及性質進行分析，通過構建蛋白酶CDF基因失活突變株等方法，重點闡明該酶在芽胞形成、萌發過程中的生理功能，並了解其與炎症相關性，為充分認識高溫放線菌及其芽胞的抗逆機制和致病機理提供新的理論依據。
結題摘要
高溫放線菌（Thermoactinomyces）屬的成員在形態上類似放線菌，但與芽胞桿菌屬具有親緣關係，在它們的菌絲末端形成內生孢子（芽胞）。高溫放線菌芽胞能夠引起人類及動物過敏性肺炎。在前期工作中，我們發現高溫放線菌CDF休眠芽胞表面具有蛋白酶活性，並在休眠芽胞表面鑑定到一種新的蛋白酶CDF。本項目對該酶生化性質進行了全面分析，發現結合在芽胞上的蛋白酶CDF比其游離形式具有更好的穩定性，位於蛋白酶CDF分子表面帶負電殘基（E和D） 對於該酶穩定性至關重要，帶正電殘基（R和K）對於該酶穩定性沒有明顯影響，但對其在高鹼性環境下發揮活性具有重要作用。對蛋白酶CDF生理功能的研究表明，該酶並非高溫放線菌CDF芽胞萌發所必需，但位於芽胞表面的蛋白酶CDF在芽胞萌發過程中具有降解芽胞衣的作用。在枯草芽胞桿菌中表達蛋白酶CDF時，影響該菌的芽胞形成，但要確定蛋白酶CDF是否與高溫放線菌CDF芽胞形成相關還需獲得該菌的蛋白酶CDF的失活突變株來確定。研究結果還表明，蛋白酶CDF具有破壞人胚肺成纖維細胞WI-38細胞間粘結的作用，而且高溫放線菌CDF的菌絲及芽胞菌可以引起WI-38細胞的白介素IL-6分泌量升高。本研究為充分認識高溫放線菌及其芽胞的抗逆機制和致病機理提拱了新信息。
