《高效菌株SH14降解嘧菌酯的分子機制研究及套用》是依託華南農業大學，由陳少華擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：高效菌株SH14降解嘧菌酯的分子機制研究及套用
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：陳少華
- 依託單位：華南農業大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
嘧菌酯是一種套用極廣泛的殺菌劑，其殘留污染及危害問題日益凸顯。微生物降解以其高效、廉價、安全等特點，成為處理農藥殘留的有效措施。在前期研究中，我們從環境中分離獲得一株嘧菌酯高效降解菌SH14，經鑑定為蒼白桿菌(Ochrobactrum anthropi)，並就其降解特性和降解條件進行深入研究，但該菌株的降解機理尚不清楚。本項目擬在前期研究基礎上，運用轉座子mariner隨機插入突變的方法，經慶大黴素抗性篩選和降解過程中產生水解圈與否篩選降解功能喪失的突變體，並利用Tail-PCR技術擴增獲得降解基因序列，同時進行誘導表達和蛋白純化。通過生物信息學分析、定點突變及GC-MS分析酶催化降解產物，確定降解酶催化反應中心，闡明嘧菌酯降解機制。通過易錯PCR隨機突變，篩選降解穩定、高效突變菌套用於農藥殘留治理研究。研究結果將豐富農藥毒理學及微生物降解內容，為嘧菌酯殘留污染治理提供關鍵技術支撐。
結題摘要
嘧菌酯是一種套用極廣泛的殺菌劑，其殘留污染及危害問題日益凸顯。微生物降解以其高效、廉價、安全等特點，成為處理農藥殘留的有效措施。在前期研究中，我們首次從環境中分離獲得一株嘧菌酯高效降解菌SH14，經鑑定為蒼白桿菌(Ochrobactrum anthropi)，並就其降解特性和降解條件進行深入研究，但該菌株的降解機理尚不清楚。本項目在前期研究基礎上，運用轉座子mariner隨機插入突變的方法，經慶大黴素抗性篩選和降解過程中產生水解圈與否篩選降解功能喪失的突變體，並利用Tail-PCR技術擴增獲得降解基因序列，同時進行誘導表達和蛋白純化。通過生物信息學分析、定點突變及GC-MS分析酶催化降解產物，確定降解酶催化反應中心，闡明嘧菌酯降解機制。通過易錯PCR隨機突變，篩選降解穩定、高效突變菌套用於農藥殘留治理研究。研究結果將豐富農藥毒理學及微生物降解內容，為嘧菌酯殘留污染治理提供關鍵技術支撐。
