體外合成蛋白質測定(IVSP),它能檢測導致開放閱讀框架改變的鹼基缺失或插人突變等。先提取細胞mRNA,將待測靶基因逆轉錄為cDNA,所用逆轉錄引物含一段T7 啟動子和真核細胞翻譯起始序列,逆轉錄產物在無細胞提取液中翻譯為相應的蛋白質。
如果基因突變導致了開放閱讀框架的改變,那么台成的蛋白質經SDSPAGE分離時會出現比正常蛋白質或長或短的重白產物。本力法的優點是突變檢出率高,並可檢測4~5kb片段的突變;缺點是不能檢測不影響開放閱讀框架的突變,且需要抽提組織mRNA。
體外合成蛋白質測定(IVSP),它能檢測導致開放閱讀框架改變的鹼基缺失或插人突變等。先提取細胞mRNA,將待測靶基因逆轉錄為cDNA,所用逆轉錄引物含一段T7 啟動子和真核細胞翻譯起始序列,逆轉錄產物在無細胞提取液中翻譯為相應的蛋白質。
體外合成蛋白質測定(IVSP),它能檢測導致開放閱讀框架改變的鹼基缺失或插人突變等。先提取細胞mRNA,將待測靶基因逆轉錄為cDNA,所用逆轉錄引物含一段T7 啟動子和...
肝臟是血清(漿)蛋白合成的主要場所,除γ球蛋白和補體外,幾乎全部的血漿蛋白質都來自於肝臟,如白蛋白、載脂蛋白、酶類及血漿部分球蛋白。 1.血清總蛋白的測定 雙...
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蛋白截斷實驗(protein truncation test,PTT)或叫體外合成蛋白質測定(IVSP),它能檢測導致開放閱讀框架改變的鹼基缺失或插人突變等。先提取細胞mRNA,將待測靶基因逆...
8.5 質譜與蛋白質分離方法聯用進行蛋白質混合物的分離和分析8.6 體內及體外標記...第9章 用蛋白質組學方法繪製磷酸化位點圖譜9.1 完整磷酸化蛋白的檢測和分析...