顯微螢光光度測量

顯微螢光光度測量是組織化學和細胞化學中的另一種重要技術,可通過測試固定組織細胞內的螢光反應物來對生物學標本進行定量分析。它對細胞內原有能發光的物質或對特定的物質選擇性染色使其能發出螢光進行分析的儀器,能觀測螢光在細胞內的定位及強度。

與吸收光度測量相比,顯微螢光光度測量有許多明顯的優點:一般螢光測量所用染料濃度遠比吸收法低,敏感度更高度;螢光輻射的光子不受物體形狀和分布的影響,所以無需掃描測量就可避免分布誤差;樣品可由計算機定位,可快速測量,適用於大樣本分析。螢光光度測量的缺點是:螢光易衰減,有漂白作用,有時會癢滅,還必須減去本底螢光值。因此測量時要提高信噪比,必須掌握適當的激發時間和合適的螢光標準。

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