《靶向LMP2特異性多肽的篩選、鑑定及套用基礎》是依託中山大學，由鐘茜擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：靶向LMP2特異性多肽的篩選、鑑定及套用基礎
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：鐘茜
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
EB病毒感染與鼻咽癌（NPC）的發生、發展密切相關，並以潛伏感染狀態存在於NPC中，只表達少數基因。其中跨膜蛋白LMP2（2A和2B）表達於大部分NPC，其 N端和C端均位於胞內；LMP2A和2B具有相同的跨膜區，該結構域與其胞內定位密切相關，所以是NPC治療的理想靶點。前期研究發現LMP2A可誘導NPC細胞發生上皮間質轉化，在成瘤和轉移中起重要作用；並以LMP2為靶標，採用噬菌體展示技術篩選出多個潛在的LMP2結合多肽。本項目擬進一步檢測它們與LMP2的親和力，鑑定出靶向LMP2並具高特異性和高親和力的多肽。基於靶向多肽與LMP2結合後，可能隨LMP2經代謝通路進入細胞內，為此我們將觀察這些LMP2靶向多肽進入細胞後，對鼻咽癌細胞的生物學行為的影響。進而，將這些靶向多肽與腫瘤成像或治療藥物偶聯，觀察LMP2靶向多肽在鼻咽癌的診斷與治療中的作用，為研發鼻咽癌的分子診斷和靶向治療提供新思路。
結題摘要
鼻咽癌惡性程度較高，鼻咽癌的原發部位較為隱蔽，患者早期症狀無特異性，在初診的病例中，晚期鼻咽癌患者約占60%左右。因此，臨床上迫切需要開發新的鼻咽癌的分子影像手段和新的靶向治療方法，實現早期診斷，及時監測腫瘤復發轉移、尤其是微小轉移灶，提高腫瘤患者的早診率和生存率。 我們噬菌體展示技術篩選出能與LMP2A特異性結合的靶向多肽（含7個胺基酸），鑑定出其靶向結合蛋白為整合素alpha6 (ITG6)，同時發現整合素6在腫瘤中高表達，是腫瘤幹細胞標誌物，以其為靶點可以實現腫瘤的分子診斷和靶向治療；該短肽結合納米顆粒可以進入體外培養的鼻咽癌細胞，並能穿透血管進入裸鼠成瘤的鼻咽癌腫瘤組織中,指出該肽是理想的分子診斷和靶向治療腫瘤的新型載體；在鼻咽癌裸鼠皮下移植瘤模型中，將該靶向多肽與分子成像試劑Cy5偶聯後，實現高特異性的腫瘤活體分子近紅外技術成像；該靶向多肽偶聯的凋亡肽，可以進入鼻咽癌細胞並誘發細胞凋亡。用納米顆粒結合該靶向多肽並包裹順鉑，可以明顯抑制腫瘤的生長，表明35號肽可用於實現體內靶向治療。 我們將短肽與放射性核素99mTc偶聯，色譜分析出99mTc-HYNIC-先導肽的分子量為1460.57。99mTc-HYNIC-先導肽注射進入小鼠，分別於30分鐘，60分鐘，120分鐘和240分鐘將老鼠猝死，測量各個器官的放射劑量，血液、心臟、肺、肝、脾、腎、胃、腸的器官攝入量其中腎的攝入量最高。明確標記靶向肽在鼻咽癌的良好顯像效果，同時在其他腫瘤如乳腺癌和肺癌中也證實了其較好的腫瘤顯像效果。在乳腺癌患者的臨床觀察實驗SPECT/CT檢測中，99mTc-HYNIC-先導肽能很好地顯示乳腺癌患者的腫瘤灶，提示該靶向肽具有良好的腫瘤分子影像的效果。 綜上所述，基於原始創新的LMP2A特異性結合的靶向多肽，是理想的分子診斷和靶向治療腫瘤的新型載體，可用於實現分子影像與靶向治療。合成的 99mTc-HYNIC-先導肽在動物模型和乳腺癌患者臨床觀察實驗中具有較好的腫瘤標記效果。
