《靶向抑制CD133+Hep-2細胞Glut-1表達增強喉癌放射敏感性的機制研究》是依託浙江大學，由周水洪擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：靶向抑制CD133+Hep-2細胞Glut-1表達增強喉癌放射敏感性的機制研究
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：周水洪
- 項目類別：面上項目
- 批准號：81372903
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
喉癌放射抵抗的確切機制尚未闡明，近年來發現腫瘤幹細胞在腫瘤放射抵抗中起重要作用，已證實喉癌CDl33+細胞具有腫瘤幹細胞特性。本課題組首次發現喉癌細胞放射抵抗與Glut-1表達有關。而CD133+細胞Glut-1表達與喉癌放射抵抗的關係，迄今國內外尚無報導。前期研究我們發現反義Glut-1能降低喉癌細胞Glut-1表達繼而提高喉癌放射敏感性，預實驗發現CD133+喉癌細胞Glut-1高表達。因此，我們提出抑制CD133+喉癌細胞Glut-1表達可提高喉癌放射敏感性的假說。為證實這一假說，我們將通過檢測喉癌細胞放射前後CD133+ 喉癌細胞及Glut-1表達變化，驗證CD133+喉癌細胞與放射抵抗有關，明確這种放射抵抗與CD133+喉癌細胞Glut-1表達密切相關；從體內外實驗研究靶向抑制CD133+ 喉癌細胞Glut-1表達而提高喉癌放射敏感性的機制，為喉癌患者保留喉功能治療提供新理論。
結題摘要
目的：研究靶向抑制CD133+Hep-2細胞Glut-1表達在喉癌放射增敏中的作用 方法：（1）檢測54例術後接受放射治療的喉癌患者喉癌組織中CD133、Glut-1, HIF-1α, PI3K, p-Akt表達。（2）致瘤體內實驗：在X線10Gy照射、反義GLUT-1、CD133和GLUT-1表達情況（3）研究CD133+喉癌細胞中Glut-1表達對喉癌放射敏感性影響及機理 結果：（1）CD133未檢測到，GLUT-1與喉癌的預後差有關；（3）在10Gy照射下GLUT-1、CD133表達較對照組增高(p﹤0.05)，在反義GLUT-1抑制GLUT-1、CD133表達較對照組及10Gy照射組下降；（3）體外研究發現siRNA-GLUT1可以提高CD133+ Hep2對放射線的敏感性，隨著放射劑量的增加，對CD133+ Hep2細胞增殖的抑制作用增強。轉染前，CD133+ Hep-2細胞對於X射線不敏感，在4Gy照射時產生放射抵抗，轉染後CD133+ Hep-2細胞凋亡率增高明顯；在轉染siRNA-GLUT1前，4Gy X射線增加CD133+ Hep2細胞侵襲能力，轉染siRNA-GLUT1之後，X射線輻照後細胞侵襲能力明顯降低；siRNA-GLUT-1轉染CD133+ Hep-2細胞後能提高其放射敏感性；成功製備喉癌Hep-2放射抵抗細胞Hep-2R; 各劑量射線照射並不能有效抑制CD133+Hep2R細胞增殖；轉染siRNA-GLUT1後，CD133+Hep2R細胞增殖受到抑制；在siRNA-GLUT1的作用下，12Gy抑制CD133+Hep2R細胞增殖、細胞凋亡; 在轉染siRNA-GLUT1前，8Gy量的X射線增加CD133+ Hep2R細胞侵襲能力，轉染siRNA-GLUT1之後，X射線輻照後細胞侵襲能力明顯降低；轉染siRNA-GLUT1後，GLUT1轉錄和蛋白表達明顯降低，X射線組均明顯降低；（4）成功建立喉癌Hep-2、Hep-2R細胞接種裸鼠移植瘤模型，CD133+-Hep2細胞敲降GLUT1組腫瘤大小、體重均顯著低於CD133+-Hep2R細胞敲降GLUT1組，表現在凋亡增加，GLUT-1表達下降。 結論：喉癌的放射抵抗或不敏感與喉癌CD133+細胞GLUT-1表達增高有關，靶向抑制CD133+細胞GLUT-1表達能增強其放射敏感性。
