降落PCR (touch-down PCR,簡稱TDPCR) 是用一個反應管或擴增目的產物而不得到人為產物或引物二聚體的循環條件下反應的PCR 方法。設計多循環反應的程式以使相連循環的退火溫度越來越低。由於開始時的退火溫度選擇為高於估計的Tm值，隨著循環的進行，退火溫度逐漸降到T 值，並最終低於這個水平。即選定一個溫度範圍，如35~ 50C，每降1~ 2C進行1~ 2 個循環，然後在50C下進行約15 個循環。
基本介紹
- 中文名：降落PRC
- 外文名：touch-down PCR
選擇初始復性溫度的原則是起始復性溫度應該比引物的Tm 值高出5一10C，然後每個循環遞減1~ 2C。該法有利於確保第一引物與模板雜交發生在最互補的反應物之間，即產生目的擴增產物的反應物之間。儘管退火溫度最終會降到非特異雜交的T 值，但此時目的擴增產物呈現指數擴增，在以後的循環中超過任何其他產物。該法尤其適用於當引物和模板的同源性未知時。隨著退火溫度降低，特異性逐步降低，但特異性條帶在溫度較高時已經擴增出來，其濃度遠遠超過非特異性條帶，隨著退火溫度的降低，特異性條帶優先被擴增。
