防脫片又叫防脫載玻片、離子修飾玻片和細胞捕獲玻片等，是用化學或物理方法進行載玻片或蓋玻片的表面修飾，常用於細胞培養、病理學組織和細胞製片、液基細胞學薄層製片，以防止操作過程中細胞或組織掉片現象的發生。
基本介紹
- 中文名：防脫片
- 又叫：防脫載玻片
- 分為：：普通防脫載玻片
- 成分：為載玻片（蓋玻片）
分類,成分,製備,套用,
分類
防脫片可分為：普通防脫載玻片、離子修飾玻片、正電荷玻片、負電荷玻片、醛化玻片、矽化玻片、氨基化玻片和細胞捕獲玻片等。
而玻片載體可以用載玻片、蓋玻片、培養皿或培養瓶等。
成分
防脫片的成分為載玻片（蓋玻片）、玻片修飾劑（黏附劑），常用的黏附劑有APES(3-Aminopropyl-Triethoxysilane 3-氨丙基-3-乙氧基甲矽烷)、多聚-L-賴氨酸（Poly-L-Lysine）、明膠、蛋清等。細胞學常用黏附劑為APES和多聚-L-賴氨酸 ，組織學常用明膠、蛋清等。
製備
一、載玻片和蓋玻片的處理
將載玻片或培養用的小蓋片浸泡在重鉻酸鉀濃硫酸清潔液中24小時，然後流水充分沖洗，再用蒸餾水沖洗3遍以上，而後置95%乙醇中12小時。取出擦乾或烤乾，貯放於玻片盒內備用。蓋玻片很薄，以上處理程式必須縮短時間，清潔液浸泡只需2小時，流水沖洗注意勿損傷玻片。
二、黏附劑的使用
1．多聚左旋賴氨酸(poly-1—lysine)
首先配製0．1%(ω/υ)多聚左旋賴氨酸濃縮液，室溫下(18～26℃)可保存1年。使用時，將試劑10倍稀釋成工作液，濃度為0．01%(ω/υ)，2—8℃冰櫃保存，有效期3個月。使用方法是將充分洗淨和預先乾燥的玻片浸泡於稀釋後的多聚左旋賴氨酸溶液數十秒或提拉十次，瀝乾．於室溫下晾乾12—24小時或在45℃以下烤箱內烘乾。處理後的玻片避光乾燥可保存三個月。
2．APES(3—氨丙基—乙氧基甲矽烷)
APES必須現用現配。用此方法黏合的玻片應垂直烤片而不能水平烤片，否則，組織片中易出現氣泡。 APES的使用方法：用丙酮50倍稀釋(APESl份、丙酮49份混合)，將洗淨的玻片放人稀釋好的APES中，停留20～30秒，取出稍停，再人純丙酮或蒸餾水中涮去未結合的APES。置通風櫥中晾乾即可。注意用APES防脫片處理的載玻片撈片時組織應一步到位．並儘量減少氣泡存在，以免影響染色結果。注意不要將APES與其他防脫片劑混合使用。
套用
防脫片用於細胞培養、病理學組織和細胞製片、液基細胞學薄層製片，尤其是在液基細胞學薄層製片中防脫片的質量至關重要，而多聚左旋賴氨酸為目前免疫組織化學染色中最常用的防脫片劑，適合於需要酶消化、微波、高溫高壓的防脫片處理。如效果不佳，可用雙重處理(APES和poly-l-lysine)的切片。在以上兩種方法均無效的情況下，可用如下方法：切片在脫蠟前放在APES l：50丙酮溶液中浸泡3分鐘，晾乾後即可進行下一步驟。
目前在細胞培養、病理學組織和細胞製片、液基細胞學薄層製片的套用中，細胞捕獲玻片使用最廣，附著力強、粘附的細胞多。
