《長非編碼RNA Rian/Irm在小鼠骨骼肌發育中的功能研究》是依託哈爾濱工業大學，由陳岩擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：長非編碼RNA Rian/Irm在小鼠骨骼肌發育中的功能研究
- 依託單位：哈爾濱工業大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：陳岩
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
長非編碼RNA（long non-coding RNA, lncRNA）在表觀遺傳、轉錄及轉錄後調控等多種層面上調控基因的表達。近年研究表明，lncRNA能夠調節骨骼肌細胞的增殖與分化，提示lncRNA對骨骼肌的發育具有調控作用。Rian作為一個母源表達的lncRNA基因，編碼多個miRNAs和snoRNAs。課題前期工作發現，該基因的三個轉錄本Meg8、Irm 和AB063319 在多種胚胎組織中持續表達，其中Irm在骨骼肌中的表達尤其顯著，提示其在胚胎骨骼肌發育中具有特殊作用。本研究將在小鼠成肌細胞及胚胎中改變和敲除Irm的表達，在細胞與個體模型中進行表達譜高通量檢測，全基因組甲基化分析，並通過形態學觀察和分子生物學手段解析和揭示Irm在骨骼肌發育中的作用及與Dlk1-Dio3 domain基因表達的相互關係，為闡明lncRNA對骨骼肌發育的調控作用及ncRNA的功能解析提供理論依據。
結題摘要
長非編碼RNA（long non-coding RNA, lncRNA）在表觀遺傳、轉錄及轉錄後調控等多種層面上調控基因的表達。近年研究表明，lncRNA能夠調節骨骼肌細胞的增殖與分化，提示lncRNA對骨骼肌的發育具有調控作用。Rian作為一個母源表達的lncRNA基因，編碼多個miRNAs和snoRNAs。課題前期工作發現，該基因的三個轉錄本Meg8、Irm 和AB063319 在多種胚胎組織中持續表達，其中Irm在骨骼肌中的表達尤其顯著，提示其在胚胎骨骼肌發育中具有特殊作用。本研究結果顯示：在整個胚胎髮育階段，Rian在胚胎E8.5~E19.5時期呈現持續表達狀態，並且從E8.5到E18.5呈現逐漸升高的趨勢，但是在E19.5其表達量下降到E18.5的25%左右，提示Rian功能可能主要呈現在胚胎髮育過程；定量RT-PCR分析Rian的三個轉錄本在小鼠E13.5、15.5、17.5、19.5胚胎舌、心臟和四肢肌肉中的表達情況，觀察到：在骨骼肌和舌中隨發育的進行Irm的表達水平逐漸提高，提示其在胚胎橫紋肌組織的發育中具有一定的調控作用；Rian的三個轉錄本在C2C12細胞分化過程中的表達呈現不同，Irm 和AB063319呈現升高的趨勢，而Meg8不表達；為了在小鼠成肌細胞系中改變Irm的表達，設計了Irm的過表達載體和干擾shRNA，轉染C2C12細胞系，將通過形態學觀察、晶片檢測及分子生物學手段來解析和揭示Irm在骨骼肌發育中的作用，其結果將為闡明lncRNA對骨骼肌分化、發育的調控作用及ncRNA的功能解析提供理論依據。
