《長角血蜱兩個生殖種群內共生菌的比較研究》是依託河北師範大學，由劉敬澤擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：長角血蜱兩個生殖種群內共生菌的比較研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：劉敬澤
- 依託單位：河北師範大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
蜱類（ticks）是專性吸血的外寄生動物，傳播多種病原體而導致疾病，對人類健康、畜牧業和野生動物造成極大危害，對其研究具有重要的科學意義。內共生菌（endosymbionts）在蜱類發育和生殖等生命活動中發揮著重要作用，是目前國際上研究的熱點領域。本項目以長角血蜱Haemaphysalis longicornis兩個生殖種群（兩性生殖種群、孤雌生殖種群）為對象，運用分子生物學、細胞遺傳學、免疫學、蛋白質組學和透射電鏡（TEM）等現代生物學技術，在課題組前期對長角血蜱深入研究基礎上，對其兩個生殖種群內共生菌的多樣性、組織特異性、形態特徵、組織內空間分布和數量動態等進行綜合分析，在比較兩個不同生殖種群內共生菌基礎上，確定長角血蜱的主要內共生菌並闡明其功能。上述研究結果對於揭示長角血蜱內共生菌多樣性、內共生菌分布和數量動態、在蜱類生殖和發育中的作用以及開展蜱類有效防治具有重要的科學意義和套用價值
結題摘要
本研究以長角血蜱Haemaphysalis longicornis為對象，採用高通量測序、細菌16S rRNA基因克隆文庫構建、RFLP和診斷PCR等方法，在分析其微生物群落基礎上，對內共生菌的種類、垂直傳遞、組織分布、數量動態和生物學功能進行了系統研究。主要結果如下：（1）長角血蜱體內微生物多樣性豐富，包括放線菌門、擬桿菌門、藍菌門、硬壁菌門和變形菌門。在屬級分類階元上，含10個屬，分別為考克斯氏體屬、葡萄球菌屬、芽孢桿菌屬、微桿菌屬、單胞菌屬、鞘氨醇單胞球菌屬、短波單胞菌屬、甲基桿菌屬、不動桿菌屬和迪茨氏菌屬。長角血蜱兩性生殖種群和孤雌生殖種群中微生物組成及豐度非常相近，且均含高豐度的Coxiella屬細菌。（2）在長角血蜱發現三種內共生菌共存，分別命名為CLS-Hl、RLS-Hl和ALS-Hl。CLS-Hl為專性共生菌，在實驗種群中能穩定遺傳。（3）從幼蜱、若蜱到成蜱，CLS-Hl數量呈增加趨勢。從卵到幼蜱，CLS-Hl數量明顯下降，表明CLS-Hl在垂直傳遞中存在“瓶頸效應”。幼蜱和若蜱吸血和蛻皮過程中，CLS-Hl數量無明顯變化，與宿主飽血和孵化無顯著相關。（4）CLS-Hl、RLS-Hl和ALS-Hl在雄蜱無組織特異性，精巢、附腺、唾液腺、中腸均有分布。ALS-Hl和RLS-Hl在雌蜱無組織特異性，但CLS-Hl特異性感染雌蜱卵巢和馬氏管。飢餓雌蜱CLS-Hl數量增加，與雌蜱吸血活動密切相關；吸血後卵巢中CLS-Hl的量迅速增加且出現峰值，與卵巢快速發育呈明顯正相關。CLS-Hl在長角血蜱兩個生殖種群中具有相同的基因序列和變化規律。（5）用抗生素（四環素）處理吸血3天的雌蜱，卵巢和馬氏管中CLS-Hl含量顯著降低，雌蜱飽食體重、產卵期、孵化率、存活率和生殖效率指數有顯著影響，表明CLS-Hl調節蜱的生殖和發育。上述研究結果揭示了長角血蜱內共生菌的種類、分布、動態和生物學功能等，對於闡明在長期演化過程中共生菌與蜱的生態關係具有重要的科學意義，並為尋找蜱類防治的新途徑提供了依據。
