鏈球菌雙組分系統的感應組氨酸激酶VicK的結構與功能

《鏈球菌雙組分系統的感應組氨酸激酶VicK的結構與功能》是依託廈門大學，由韓愛東擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：鏈球菌雙組分系統的感應組氨酸激酶VicK的結構與功能
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：韓愛東
• 依託單位：廈門大學

項目摘要

VicK和VicR是肺炎pneumonia等致病的鏈球菌中生死攸關的雙組分系統(two component system，TCS)。VicK是帶有感應元件HAMP和PAS的跨膜的組氨酸激酶，首先負責對各種刺激作出反應，然後提過磷酸化傳遞，調節VicR介導的應急性基因轉錄，但至今不清楚HAMP和PAS如何將信號轉導至激酶。我們認為全長的VicK的晶體結構是解答該問題的關鍵。三年多來，我們已能表達純化大量的VicK，並摸索到了使VicK穩定的溶液體系，還成功的篩選和最佳化了它的結晶條件。目前VicK的晶體已經能衍射到4埃。本提案擬採用各種方法進一步最佳化VicK的晶體，並最終解析它的結構。接著擬採用多種生物化學及微生物學的手段，從結構和功能關係上探討HAMP和PAS如何將信號從刺激反應轉導到激酶反應的分子機制。高解析度的晶體結構將同時為研製新的對付耐藥性的細菌感染的抗菌素提供重要的結構基礎。

結題摘要

VicK／VicR是肺炎pneumonia等致病的鏈球菌中生死攸關的雙組分系統(two component system，TCS)。VicK是帶有信號轉導元件HAMP和感應元件PAS的組氨酸激酶。它首先負責對各種胞內外的刺激作出反應，改變自身的磷酸化狀態，進一步調節VicR的結合DNA啟動子，介導各種應急性基因的轉錄。但至今不清楚HAMP和PAS如何將信號轉導至激酶。幾年來，我們幸運地受到國家自然科學基金委的資助，成功地解析了全長的VicK的晶體結構，並進行了相應的點突變和生物化學的研究，分析了VicK激酶的活化機制。最後我們綜合結構和各類數據，提出了組氨酸激酶激化的新模型。