《鋅指蛋白A20對根尖周炎中TLR4/TRAF6/NF-κB信號通路的調控作用研究》是依託武漢大學，由熊浩飛擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：鋅指蛋白A20對根尖周炎中TLR4/TRAF6/NF-κB信號通路的調控作用研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：熊浩飛
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
NF-κB是炎症反應中重要的轉錄因子，它的反常激活可導致多種自身免疫性疾病和炎性疾病的發生。鋅指蛋白A20作為NF-κB信號系統負反饋調節因子，近年來被研究認為在免疫炎症反應中發揮重要調控作用。本課題通過獲取人體病變組織標本和建立動物模型，深入研究TLR4/TRAF6/NF-κB通路在根尖周病中的作用，並選擇A20作為切入點，研究A20的表達與NF-κB，以及其上游信號轉導分子TLR4、TRAF6和下游炎症因子產物之間的相互關係；通過RNA干擾抑制或基因轉染過表達，干預人牙周膜細胞，研究根尖周炎中A20對NF-κB信號系統的負反饋作用，以及A20干預對PDLF誘導分泌效應的影響。同時將干預後的PDLF 與破骨前體細胞建立細胞互動作用立體模型，觀察其對破骨細胞骨吸收的影響。本課題研究對進一步闡明根尖周病炎症和骨破壞病理過程和深入探索根尖周炎免疫調控機制具有重要意義。
結題摘要
建立根尖周病動物模型，組織學方法檢測根尖骨破壞面積，免疫組化檢測根尖周病不同病變時期A20、TLR4、TRAF6和炎症因子IL-17、IL-23、RANKL等表達水平以及破骨細胞的表達數量。分析實驗動物根尖周病變組織中炎症因子表達水平與炎症進展、破骨細胞數目以及骨破壞大小之間的關係。獲取患者根尖周病變組織後通過免疫組化檢測組織中A20、TLR4等的表達，同時Real time-PCR檢測相關蛋白調控基因的表達。體外培養人牙髓細胞，用炎症因子IL-17、IL-1β刺激後，Real time-PCR和ELISA檢測IL-6、IL-8和IL-23基因和蛋白水平的表達。基因轉染過表達干預牙髓胞A20的表達，檢測IL-23基因和蛋白水平的表達變化情況。從而闡明實現A20表達干預後的人牙髓細胞活化和功能狀態的改變情況，以及對細胞TLR4/TRAF6/NF-κB通路介導的炎症的調控效應，以闡明其在根尖周炎變中的作用。
