鉤端螺旋體病乳膠凝集試驗

鉤端螺旋體是一種細長柔軟螺旋體，廣泛存在於多種野生動物與家畜體內。

基本介紹

• 中文名：鉤端螺旋體病乳膠凝集試驗
• 別名：鉤端螺旋體乳膠凝集試驗

病症介紹

鉤端螺旋體是一種細長柔軟螺旋體，廣泛存在於多種野生動物與家畜體內，可引起人類及哺乳動物的全身性感染，帶菌動物是鉤端螺旋體的主要傳染源，以接觸傳播為主。在我國鼠和貓是主要傳染源。當人感染後，採集發病2周的血液檢查血清IgM抗體，對早期診斷鉤端螺旋體病有重要價值。2～4周后出現IgG抗體，以後以IgG抗體為主。

分類

血清學檢查 > 其他

鉤端螺旋體病乳膠凝集試驗的原理

鉤端螺旋體病患者體內產生的抗體與膠乳抗原混合後產生清晰均勻的凝集顆粒。

試劑

（1）抗原製備：

①提取致敏物：將鉤端螺旋體培養物（如黃疸出血熱型）濃縮至菌數為100億/ml。加苯酚至最終濃度為0.3%，使溶菌，取0.3%苯酚菌液1ml加無水乙醇9ml，置40℃冰櫃24h，使抗原沉澱，然後2000r/min離心10min，取沉澱加硼酸緩衝液（pH8.2）至原量，即成致敏物。

②膠乳處理：取10%膠乳液3ml加1%胰蛋白酶液（硼酸緩衝液配製）1ml及硼酸緩衝液6ml，56℃水浴24h，取出用4000r/min離心45min，棄上清液，沉澱用硼酸緩衝液，稀釋至5ml。

③致敏法：取致敏物10ml徐徐加入處理膠乳10ml，邊加邊搖，放入56℃水浴中24～48h（每天搖2～3次）。取出放室溫3～5天測定後套用。

④抗原測定：取免疫血清、陽性患者血清、陰性血清及生理鹽水各1滴，分別滴於玻片上，各加致敏膠乳抗原1滴，混勻，觀察結果。如免疫血清及陽性血清均發生明顯凝集，陰性血清及生理鹽水仍為均勻乳狀者，即可套用。

（2）鉤端螺旋體免疫血清：由生物製品所供應，效價1∶6000為宜。

操作方法

（1）將背面塗黑漆的玻板，正面清潔乾燥，用紅油漆劃成小圓圈（內徑約2cm），或劃成方格亦可。患者血清經56℃、30min滅活。

（2）試驗時同時進行乳凝抑制試驗及乳凝試驗：於玻板上左右兩側劃記號，各加患者血清兩滴，左側加免疫血清1滴混勻，室溫放1～2min，於兩側各加膠乳抗原液1滴，混勻，1～3min觀察結果。

正常值

0～1∶40。

化驗結果臨床意義

陽性：滴度高於1∶40可作為鉤端螺旋體病的診斷依據。

附註

鉤端螺旋體可直接鏡檢，簡便、快速，有早期診斷意義，但陽性率低。也可製成乾片用鍍銀染色或直接螢光抗體染色或免疫酶染色法檢查，尤以後者敏感性高，適用於早期診斷。

相關疾病

鉤端螺旋體病、黃疸