金黃色葡萄球菌SprC下調免疫逃避蛋白Efb表達的分子機制

《金黃色葡萄球菌SprC下調免疫逃避蛋白Efb表達的分子機制》是依託上海交通大學，由劉慶中擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：金黃色葡萄球菌SprC下調免疫逃避蛋白Efb表達的分子機制
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：劉慶中
• 依託單位：上海交通大學

項目摘要

我們前期發現金黃色葡萄球菌SprC（致病島小RNA C）能結合efb mRNA下調Efb表達，但兩者結合的核苷酸及影響此結合和結合後mRNA穩定性的因素未明。Efb是金黃色葡萄球菌重要毒力因子，能抑制宿主天然免疫應答。據研究：細菌sRNA主要通過結合mRNA核糖體結合位點（RBS）影響靶蛋白翻譯，RNA伴侶Hfq能促進兩者結合，結合後可能觸發RNase III活性影響mRNA穩定性。故推測SprC下調Efb表達可能是通過結合efb mRNA RBS實現的；Hfq和RNase III可能促進兩者結合及降低mRNA穩定性。本項目擬以分子生物學、生物信息學及生物化學等方法闡明SprC下調Efb表達的分子機制，探討Hfq在SprC與efb mRNA結合中的作用及RNase III對efb mRNA 穩定性的影響。研究結果有助於深入了解金黃色葡萄球菌致病機理，為改進該菌感染的預防和治療策略提供線索。

結題摘要

金黃色葡萄球菌是困擾全球公共衛生及人類健康的重要病原菌，其引起的各種臨床感染與該菌表達的多種毒力因子密切相關，而這些毒力因子的表達調控在細菌致病機制中發揮著核心作用。當前，細菌的耐藥性發展迅速，且不斷增強，使得現有的抗菌藥物難以滿足臨床抗感染需求。而針對細菌毒力因子表達的重要調節因子設計的藥物可以減弱細菌致病力，減少抗菌藥物新耐藥機制形成的壓力，因而成為研發新型抗感染藥物的新方向。sRNA是細菌調節毒力基因表達的一類關鍵分子，但對涉及sRNA 調控金黃色葡萄球菌毒力因子表達調控機制的了解仍然處於起步階段。本項目研究內容主要為，在金黃色葡萄球菌非編碼小RNA C（SprC）能下調免疫逃避蛋白胞外纖維蛋白原結合蛋白Efb表達基礎上研究SprC調控Efb表達的分子機制。分子生物學（如同源重組、RACE技術、northern blot、qRT-PCR、western blot,等）、生物信息學等方法的實驗結果顯示，SprC通過其 5′-非編碼區（5′-UTR）的58個核苷酸與efb mRNA 5′-UTR的78個核苷酸反義結合形成二聚體，在翻譯水平負調控Efb蛋白表達。SprC-efb mRNA 複合物不能觸發雙鏈特異性核酸內切酶III（RNase III）的水解活性降低efb mRNA 穩定性。RNA伴侶Hfq在SprC調控Efb表達調控過程中也不發揮作用。本研究結果闡明了SprC在Efb表達調控中所起的作用及其分子生物學作用機制，為豐富該菌毒力調節的網路理論、深入了解金黃色葡萄球菌致病機理及有效的干預金黃色葡萄球菌毒力基因表達調控環節改進金黃色葡萄球菌感染的預防和治療策略提供線索。