重編程人脂肪幹細胞向表皮細胞分化與機制的研究

《重編程人脂肪幹細胞向表皮細胞分化與機制的研究》是依託上海交通大學，由張群擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：重編程人脂肪幹細胞向表皮細胞分化與機制的研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：張群
• 依託單位：上海交通大學

項目摘要

細胞重編程是近年來的重大科學突破。文獻證實，細胞重編程的出路未必一定回歸胚胎狀態，而是能直接賦予細胞以新的成熟命運。供體細胞之細胞抽提物（包含細胞質及細胞核的可溶解成分）引入另一種受體細胞（成體幹細胞或成纖維細胞）內，可使受體細胞表達供體細胞表型。前期研究證實將人的表皮細胞抽提物引入到人脂肪幹細胞中，可使後者重編程而表達表皮細胞的標誌。本試驗將進一步研究表皮細胞抽提物對脂肪幹細胞的重編程作用，研究重編程的脂肪幹細胞向表皮分化後修復創面的可行性，另外，本研究對重編程機理進行了初步研究，對抽提物中的有效重編程物質做初步鑑定。.本研究的成功將有可能為細胞定向誘導分化供新的技術手段，為組織工程人造器官提供種子細胞來源。抽提物重編程技術平台之建立，有利於進一步鑑別、純化抽提物中的關鍵物質。

結題摘要

本課題的目的在於通過細胞抽提物重編程的方法改變細胞的表型，使來源豐富的幹細胞轉分化為目的細胞，則可為臨床許多疾病提供治療所需的細胞。本課題研究將人表皮細胞抽提物引入人脂肪幹細胞中，觀察能否對後者進行重編程。提取表皮細胞的細胞抽提物（含細胞核和細胞質的可溶解成分）後，將表皮細胞來源的抽提物與通透處理過的脂肪幹細胞孵育1小時後用CaCl2重新封閉細胞膜通道並行體外培養。在實驗中，我們對表皮來源的抽提物進行了最佳化處理，通過IV膠原差速貼壁法分選得到表皮幹細胞（KSC）與剩餘的表皮細胞（KCL），與常規方法收集的表皮細胞（KC）對比，發現KSC在表皮幹細胞的特異性表達及重編程效應方面均最顯著。脂肪幹細胞在表皮細胞抽提物的作用下細胞形態發生變化，呈現鋪路石樣改變。重編程後的脂肪幹細胞表達廣譜角蛋白（CK），且BRG1的表達量增加。由實驗結果可以表明表皮細胞抽提物重編程脂肪幹細胞能一定程度上向表皮細胞方向分化，且分選的表皮幹細胞的重編程效應更強。