《重組腺相關病毒介導siRNA抑制Notch信號抗肝纖維化的實驗研究》是依託華中科技大學，由翁志宏擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：重組腺相關病毒介導siRNA抑制Notch信號抗肝纖維化的實驗研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：翁志宏
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
肝纖維化是各種慢性肝病向肝硬化發展的必經階段。肝星狀細胞（HSC）的活化是肝纖維化形成和發展的中心環節，抑制HSC的活化和增殖可阻斷甚至逆轉肝纖維化。Notch信號是調控多種細胞增殖、分化和凋亡的關鍵信號通路，申請者初步研究發現Notch3蛋白的表達與肝纖維化病變相關，在此基礎上，本課題擬進一步深入研究分離培養的大鼠HSC和表型活化的HSC細胞系中Notch3信號通路的活性及其與HSC表型轉化的關係；構建靶向干擾Notch3的siRNA重組腺相關病毒載體，分別轉染HSC和導入肝纖維化模型大鼠體內，擬採用分子生物學，細胞生物學和病理形態學等方法，從體外和體內實驗兩個層面來研究抑制Notch3信號對HSC表型轉化的調控和生物學特性的影響，闡明其在肝纖維化發生髮展中的作用機理，並探索以此為靶點治療肝纖維化的可行性，為臨床肝纖維化的防治提供新的理論和方法。
結題摘要
肝星狀細胞（HSC）的活化是肝纖維化形成和發展的中心環節，抑制HSC的活化和增殖可阻斷甚至逆轉肝纖維化。Notch信號是調控多種細胞增殖、分化和凋亡的關鍵信號通路。本研究證實活化的HSC高表達Notch3、Jagged1和Hes1蛋白，且Notch3/Jagged1信號通路的激活與HSC的活化密切相關。體外試驗發現用γ-分泌酶抑制劑（DAPT）或特異性RNAi靶向抑制Notch3/Jagged1信號的轉導，HSC表達α-SMA和collagen I蛋白明顯下降。大鼠肝纖維化模型體內試驗結果顯示DAPT和rAAV-Notch3-shRNA 都可不同程度的改善肝纖維化病變。我們進一步研究發現抑制Notch3/Jagged1信號後，肝細胞上皮-間質轉分化過程（EMT）被抑制，肝細胞凋亡減少。本項目探索了以重組腺相關病毒載體rAAV介導shRNA靶向干擾Notch3/Jagged1信號的新基因療法治療大鼠肝纖維化，為將來可能的臨床套用提供了實驗依據。
