酶標分析儀即酶聯免疫檢測儀，是酶聯免疫吸附試驗的專用儀器又稱微孔板檢測器。
基本介紹
- 中文名：酶標分析儀
- 外文名：Enzyme-labeled Instrument
- 醫療器械分類：臨床檢驗器械
- 一級產品類別：免疫分析設備
- 二級產品類別：免疫分析一體機
- 管理類別：Ⅱ類醫療器械
簡介,原理,分類,相關概念,檢測結果的解釋,用途,操作注意事項,常見故障及處理,
簡介
酶標分析儀即酶聯免疫檢測儀，是酶聯免疫吸附試驗的專用儀器又稱微孔板檢測器。酶標分析儀分為半自動和全自動兩大類，其工作原理基本一致，核心都是一個比色計，即用比色法來進行分析。與適配試劑配合用於生物樣本中待測物的定性和定量分析。
原理
酶標分析儀本質為一台變相光電比色計或分光光度計，基本工作原理與主要結構和光電比色計基本相同。光源燈發出的光波經過濾光片或單色器變成一束單色光，進入塑膠微孔板中的待測標本。該單色光一部分被標本吸收，另一部分則透過標本照射到光電檢測器上，光電檢測器將這些光信號轉換成相應的電信號，電信號經前置放大、對數放大、模數轉換等信號處理後送入微處理器進行數據處理和計算，最後由顯示器和印表機顯示結果。微處理機還通過控制電路控制機械驅動機構X方向和Y方向的運動來移動微孔板，從而實現自動進樣檢測過程。有些酶標分析儀採用手工移動微孔板進行檢測，省去了X，Y方向的機械驅動機構和控制電路，從而使儀器更小巧，結構也更簡單，如圖所示。
分類
按照功能不同酶標分析儀可以分為光吸收酶標儀，螢光酶標儀，化學發光酶標儀和多功能的酶標儀。
1.光吸收酶標儀
光吸收酶標儀是用來進行可見光與紫外光吸光度的檢測。特定波長的光通過微孔板中的樣品後，光能量被吸收，而被吸收的光能量與樣品的濃度呈一定的比例關係，由此可以用來定性和定量的檢測。光吸收的檢測技術成熟，成本低，操作簡單，但是動態範圍窄，靈敏度比較低，特異性不強。一般可見光和紫外光分別採用鎢燈及氘燈作為光源，而紫外/可見酶標儀是可以將兩種光源進行切換，適應不同測量波長的需求。
2. 螢光酶標儀
螢光酶標儀是用來進行螢光的檢測。通過激發光柵分光後的特定波長的光照射到被螢光物質標定的樣品上後，會發出波長更長的發射光，通過發射光柵後到達檢測器。螢光的強度與樣品的濃度呈一定的比例。螢光檢測靈敏度高，可實時檢測，使用方便，檢測模式多樣，但是容易受外界干擾，激發光與發射光容易互相影響，干擾檢測。
3. 化學發光酶標儀
化學發光酶標儀是來自生物化學反應中的自發光，可分為輝光型和閃光型兩種類型。輝光型發光持久，穩定，能持續一段時間；閃光型發光時間短，變化快，穩定性不強，需要套用自動加樣器才可以進行。化學發光酶標儀靈敏度非常高，動力學範圍廣。
4. 多功能酶標儀
多功能酶標儀是以上三種酶標儀的集合，集成了兩種或者三種酶標儀於一體，可以同時進行光吸收，螢光和化學發光的檢測，功能強大，使用範圍廣，可作為研究平台，避免了重複購買，是實驗室的首選。
按照濾光方式的不同酶標儀可分為濾光片式酶標儀和光柵式酶標儀。
1.濾光片式酶標儀
濾光片式酶標儀採用濾光片來進行波長的選擇，光源發出的全波譜光經過濾光片後，大部分被過濾，只剩下濾光片本身允許的波長通過，因此只能截取特定波長進行檢測。
2. 光柵式酶標儀
光柵式酶標儀採用光柵進行分光，光源發出的全波譜光線經過光柵後，通過光柵上面分布的一系列狹縫的分光，就可以獲得任意波長的光，波長連續可調。光柵式酶標儀使用方便靈活，可選擇任意波長的光，也能進行全波長的掃描，通過全波長掃描可以獲得未知樣品的吸收峰，從而可以達到檢測未知樣品的目的。
相關概念
1. 微孔板。是一種經事先包埋專用於放置待測樣本的透明塑膠板，板上有多排大小均勻一致的小孔，孔內都包埋著相應的抗原或抗體，微孔板上每個小孔可盛放零點幾毫升的溶液。
2. 中心定位。儀器會自動對酶標孔進行中心定位，中心定位是要消除酶標孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來檢測的不準確。在對每一個酶標儀進行檢測時，儀器其實要進行35個點的測量，選取最中間的5個點的均值為本孔的OD（optical density）值。
3. 光源的參照通道。參照通道是用來校準由於電壓不穩或燈泡磨損帶來的影響。
4. 質量控制。質量控制是試劑檢測的重要因素。請按照試劑說明書的要求進行質量控制。
5. 空白校正。有一些試劑盒的說明書將空白孔設定為空氣，其它大多數空白孔的設定是用試劑來設定的，請按照試劑盒的說明書要求進行。
檢測結果的解釋
由於有相當多的因素會影響檢測的結果，如不同的酶標板，檢測試劑的體積，都會造成OD值的不同，因此，只有使用同一酶標板反應的試劑檢測結果才能比較和分析。對結果的臨床解釋請依照試劑盒的說明書進行。
用途
酶標儀廣泛地套用在臨床檢驗、生物學研究、農業科學、食品和環境科學中，例如低紫外區的DNA、RNA定量及純度分析（A260/A280）和蛋白定量，酶活、酶動力學檢測，酶聯免疫測定（ELISAs），細胞增殖與毒性分析，細胞凋亡檢測（MTT），報告基因檢測及G蛋白偶聯受體分析（GPCR）等。特別在近幾年中，由於大量的酶聯免疫檢測試劑盒的套用，使得酶標儀在生殖保健領域中套用越來越廣泛，同時促進了生殖健康技術水平提高。
操作注意事項
酶標儀的功能是用來讀取酶聯免疫試劑盒的反應結果，因此要得到準確結果，試劑盒的使用必須規範。許多醫院在使用酶標儀之前是通過目測判斷結果，操作過程隨意性較大，在使用酶標儀後如果不能及時糾正操作習慣，會造成較大誤差。在酶標儀的操作中應注意以下事項：
1. 使用加液器加液，加液頭不能混用。
2. 洗板要洗乾淨。如果條件允許，使用洗板機洗板，避免交叉污染。
3. 嚴格按照試劑盒的說明書操作，反應時間準確。
4. 在測量過程中，請勿碰酶標板，以防酶標板傳送時擠傷操作人員的手。
5. 請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內部，操作完成後請洗手。
6. 如果使用的樣品或試劑具有污染性、毒性和生物學危害，請嚴格按照試劑盒的操作說明，以防對操作人員造成損害。
7. 如果儀器接觸過污染性或傳染性物品，請進行清洗和消毒。
8. 不要在測量過程中關閉電源。
9. 對於因試劑盒問題造成的測量結果的偏差，應根據實際情況及時修改參數，以達到最佳效果。
10. 使用後蓋好防塵罩。
11. 出現技術故障時應及時與廠家聯繫，切勿擅自拆卸。
常見故障及處理
故障一：開機後無反應。應檢查電源線是否接好，保險絲是否燒斷。
故障二：原始吸光度多為負值。應檢查空白孔的吸光度值是否太高，酶標儀列印出的原始吸光度值是減去空白以後的，如空白太高則可能出現負值。
故障三：酶標儀在使用定量功能時，曲線出現異常形態。可能客戶使用了線性/對數的曲線模式，同時使用了濃度為0的標準物，導致機器無法對0取對數，從而形成了異常的曲線形態。
故障四：在做定量測定時，列印報告中的濃度值出現****，提示超出曲線範圍。標準的吸光度過高可能導致曲線的上移，使許多低吸光度值的樣本無法列印在報告上，可以通過稀釋標準樣本使曲線下移，從而解決上述的問題。
