酶免疫測定儀

酶免疫測定儀是以以酶標記的抗體(抗原)作為主要試劑，將抗原抗體反應的特異性和酶催化底物反應的高效性和專一性結合起來的一種免疫檢測技術為基礎的免疫系統測定儀器。

基本介紹

• 中文名：酶免疫測定儀
• 外文名：EnzymeImmunoassay Apparatus
• 管理類別：Ⅱ類醫療器械
• 分類名稱：免疫分析系統

分類

根據固相支持物的不同可將酶免疫測定儀分為微孔板固相酶免疫測定儀、管式固相酶免疫測定儀、微粒固相酶免疫測定儀和磁微粒固相酶免疫測定儀等。

微孔板固相酶免疫測定儀是臨床上最為常用的酶標儀，也稱為ELISA測讀儀(ELISA reader)。根據通道的多少可分為單通道和多通道酶標儀；根據自動化程度可分為半自動和全自動兩類，多通道酶標儀檢測速度快，一般均為自動化型；根據波長是否可調節又分為濾光片酶標儀和連續波長酶標儀。

工作原理

分光光度法是酶免疫測定儀的基本工作原理，臨床上常用的酶免疫測定儀基本上都是在光電比色計或分光光度計的基礎上根據酶聯免疫吸附測定的特點進行設計的。以臨床上最常用的酶標儀為例，酶免疫測定儀的工作原理如圖1所示。

光源發出的光束通過濾光片或單色器後，成為單色光，再經塑膠微孔板中的待測標本吸收一部分後到達光電檢測器，光電檢測器將接收到的光信號轉變為電信號，再經過前置放大、對數放大、模數轉換等模擬信號處理後，進入微處理器進行數據的處理和計算，最後的檢測結果在顯示器上顯示並可以直接列印出來。

光照射微孔板的過程中，儀器會自動對酶標孔進行中心定位，以消除酶標孔底的凹凸不平所帶來的檢測誤差，一般情況下，儀器要進行35個點的測量，然後選取中間的5個點的均值作為本孔的最終測量結果。光通過被檢測物，前後的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量。在特定波長下，同一種被檢測物的濃變與被吸收的能量成定量關係。酶標儀就是利用以上原理通過測定一定波長下待測物的吸光度值來得出待測物的相應濃度的。

圖1 酶免疫測定儀的工作原理

圖1 酶免疫測定儀的工作原理

基本結構

以酶標儀為例，其結構主要包括兩部分，即主機部分和微機部分。主機部分為儀器的運行反應測定部分，包括原材料配備部分、液路部分、機械傳動部分光路檢測部分。微機部分是儀器的控制中心，其功能有程控操作、自動監測、指示判斷、數據處理、故障診斷等。

圖2為酶標儀的光路結構圖，如圖所示光源燈發出的光經聚光鏡、光欄後到達反射鏡,經反射鏡作90°反射後垂直通過比色溶液，然後經濾光片送到光電管。

圖2 酶標儀的光路結構圖

圖2 酶標儀的光路結構圖

臨床套用

1.病原體及其抗體的檢測。

2.各種免疫球蛋白和細胞因子、補體等的檢測。

3.腫瘤標誌物的檢測。

4.多種激素的檢測。

5.藥物和毒品的檢測。

優點

具有高敏感性、特異性、試劑穩定、操作簡便、對環境污染小等優點。

使用注意事項

酶免疫測定儀在使用的過程當中對環境條件有一定的要求，一定要注意防電、防震，遠離強磁場，避免日光直接照射，溫度保持在10~30℃，相對濕度要≤70%，交流電源電壓保持在220V±10%範圍內，並且要在機器兩邊留出足夠的空間以保證空氣流通。具體的操作程式不同型號的酶免疫測定儀會有所不同，操作人員應嚴格按照儀器的操作說明書進行檢測。

日常維護保養

酶免疫測定儀主要是通過吸光度或光密度來反映被測物質的含量，所以如果想讓酶免疫測定儀的結果準確可靠，就要把維護的重點放在光學部分，而光學部分的維護主要是防止濾光片霉變，應定期檢測校正，保持其良好的工作性能，做到：

1. 每天要核對濾光片波長；

2. 每周清潔儀器表面，保護光學零件不沾灰塵；

3. 每年檢查、清洗濾光片，如果出現破裂或霉點則要更換。

常見故障處理

常見故障	故障原因	處理方法
開機後無反應	電源未接通	1.電源線是否接好 2.保險絲是否燒斷
儀器顯示“酶標板錯誤”	卡板	關機後用手推載板架，同時檢查有無異物造成阻礙
目測結果與酶標儀測定結果差異較大	濾光片設定不正確	重新按濾光片輪中實際的情況設定濾光片參數
重複性差	光路及機械傳動部分不穩定	1. 應重點檢查光源是否穩定(測試光源電壓) 2.程控放大器輸出是否穩定 3.導軌移動是否平穩，導軌應保持清潔，加塗一些潤滑脂
印表機不工作	1.連線問題 2.酶標儀設定問題 3.印表機方面故障	1. 檢查印表機與儀器的接口是否正常 2.儀器內置印表機是否關閉 3.檢查儀器有無設定外置印表機 4.印表機無紙或紙未裝好 5.注意印表機開機順序，以及印表機是否與儀器兼容

參考文獻

[1]黎皓,程伯鯤.纖維素載體的酶免疫測定技術[J].生物工程進展,1995(01):51-52.

[2]郭積燕.免疫學檢驗中的酶免疫技術[J].中華檢驗醫學雜誌,2005(02):98-101.

[3] 須建,彭裕紅.臨床檢驗儀器[M].北京:人民衛生出版社,2015:211-217.