酵母RNaseH2磷酸化調控機制及其生理功能的研究

《酵母RNaseH2磷酸化調控機制及其生理功能的研究》是依託上海交通大學，由侯敬麗擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：酵母RNaseH2磷酸化調控機制及其生理功能的研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：侯敬麗
• 依託單位：上海交通大學

項目摘要

真核生物RNaseH2在生物體DNA複製、修復和RNA轉錄等方面具有重要作用。一些人類RNaseH2基因突變可破壞RNaseH2蛋白的翻譯後修飾，引起AGS綜合徵。然而RNaseH2翻譯後修飾的調控機制仍然並不清楚，這極大阻礙了RNaseH2胞內功能和AGS發病機理的研究。本項目擬以模式生物酵母為例，研究RNaseH2磷酸化調控機制。具體研究內容包括細胞內外測定Bud32、Cak1p或Kss1蛋白對RNaseH2的磷酸化作用，確定磷酸化位點；測定磷酸化修飾前後 RNaseH2蛋白穩定性、酶活性和其他蛋白與RNaseH2的相互作用以及這些蛋白對RNaseH2酶促反應的影響。根據以上結果闡明Bud32p、Cak1p或Kss1p蛋白磷酸化調控酵母RNaseH2的作用機制以及磷酸化對RNaseH2結構和功能的影響，推測磷酸化RNaseH2影響DNA複製或修復的機制，促進AGS綜合徵發病機制的研究。

結題摘要

真核生物RNaseH2在生物體DNA複製、修復和RNA轉錄等方面具有重要作用。RNaseH2的磷酸化調控機制對RNaseH2胞內功能以及AGS發病機理的研究具有重要的理論和套用價值。本研究利用建立的蛋白質組定性和定量分析平台，以模式生物酵母為例，詳細分析了Bud32蛋白與RNaseH2複合物的相互作用以及Bud32對RNaseH2的磷酸化作用，鑑定磷酸化作用位點。另外，測定磷酸化修飾前後RNaseH2穩定性、酶活性和其他蛋白與RNaseH2的相互作用以及這些蛋白對RNaseH2酶促反應的影響。本項目的研究成果將有利於酵母RNaseH2的磷酸化調控作用機制以及磷酸化RNaseH2結構和功能的研究。